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检测血中HBV DNA是判断乙肝最可靠的方法

时间:2010-12-29 00:37|来源:实验室前沿| 分享|点击:


血中HBV DNA的存在是HBV感染最为直接,最为灵敏和最为特异的指标。HBV DNA检测方法目前在国内使用最广的是聚合酶链反应(PCR)。使用PCR检测血中HBV DNA,其临床诊疗价值主要有:

内容来自实验室前沿网站

    1.急性HBV感染的诊断。当机体感染HBV时,在外周血中HBVDNA的出现要早于其他血清学抗原抗体指标,并且只有HBVDNA存在才会引起感染,因此使用极为灵敏特异的PCR方法检测HBVDNA可为急性HBV感染提供直接证据。
 
    2.可用于筛选献血员,监测血制品的传染性和血源性乙肝疫苗的安全性。
 
    3.HBVDNAPCR检测结果与血清免疫学检测结果的综合评价。乙肝“两对半”或乙肝“六项”(“两对半”加上抗HBc-IgM)的ELISA检测,是临床实验室最常用来检测乙肝的方法,如何看待其检测结果与HBVDNA检测结果之间的关系,是临床医师以及患者最为关心的问题,关系到临床治疗方案的确定。
 
    (1)与HBsAg检测结果的关系:在实践中,常遇到的问题是HBsAg ELISA测定结果与HBVDNA检测结果之间的不一致,有两种情况:一是HBsAg阴性而HBV DNA PCR测定阳性;二是HBsAg阳性但HBVDNA阴性。前者可能是因为HBsAgELISA测定敏感性低,对极低浓度的HBsAg测不出,而PCR具有极高的灵敏度,HBVDNA含量即使很低(甚至低至数个分子),亦可检测出来;或HBsAg确已消失,但HBVDNA仍持续存在,病毒仍处于低水平复制状态;再有,就是“a”抗原决定簇是HBV中和抗体作用的靶位,其相应的编码基因发生变异,则无法用常规的双抗体(抗HBs)夹心ELISA方法检出HBsAg,变异病毒株则可以逃避机体的免疫监视而持续存在,表现为HBsAg阴性,而HBVDNA阳性。此外,在HBV初期感染时,也可能是有HBV DNA而无HBsAg。HBVDNA阴性才是HBV消除的明确指标。HBsAg阳性而HBVDNA阴性其原因一为血中BVDNA虽然存在,但是在特定的PCR检测方法的下限以下,如有的PCR试剂灵敏度差,检测HBVDNA的下限仅至1 000或100个拷贝。第二种可能为血中存在的HBsAg是由HBVDNA整合到人染色体与宿主基因共同表达所致,所以测不到血清中病毒DNA。通常,HBsAg阳性血清,PCR检测HBVDNA的阳性率约为96%。肝组织活检样本HBVDNAPCR检测阳性率为100%。
 
    (2)与抗HBs的关系:HBV感染后至恢复期抗HBs阳性,血清HBVDNAPCR检测一般为阴性,少部分亦可为阳性,但肝组织HBVDNAPCR阳性率仍可高达77.3%.说明HBV仍存在于肝脏中。
 
    (3)与HBeAg,抗HBe和抗HBc的关系:HBeAg阳性血清,HBVDNAPCR检测几乎全为阳性,并且大部分(超过60%)含量大于107拷贝/m1;HBeAg阴性而抗HBe阳性者,绝大部分HBVDNA含量小于103拷贝/ml,但仍有少部分(约10%)大于107拷贝/ml;在HBsAg阳性和抗HBc阳性者中,有将近一半其血清HBVDNA含量大于103拷贝/ml,约1/3大于107拷贝/m1。慢性乙肝患者外周单个核细胞中HBVDNAPCR检测阳性率较高,是乙肝复发的一个主要原因。上述表明,血清HBeAg阴性和抗HBe阳性,说明病毒复制减弱,血中HBVDNA减少,但并未完全消失,并且少部分患者的HBVDNA含量还可能较高,因此,仅依靠抗原抗体检测,难以判断病毒复制的程度及传染性强弱,PCR检测HBVDNA应是评价传染性的最可靠的方法。
 
    4.治疗效果和抗病毒药物的疗效评价。HBV DNA检测是乙肝病毒抗病毒治疗惟一有效的监测指标,目前国内用于HBVDNA定量测定的方法基本上为聚合酶链反应(PCR),并以外标准作为定量依据。在临床检验中,任何一种临床检验方法对同一份病人标本在不同的测定批次,检测某种指标均有一定的结果差异,不可能完全一样,就像打靶一样,同一个人用同一支枪,枪再准,人素质再高,也是这次打10环,下次就是9.5环,再次又是10.2环,再或又是10环或只有9环。每次差异的多少跟枪和人有很大关系,像奥运会冠军,每枪间的环数差异就小,像普通人,则差异就很大。临床检验也是如此。PCR用于HBVDNA定量检测,如是使用外部标准进行定量,再加上HBVDNA定量数值大,通常不同测定次间差异会较通常的检验项目大,一般量值变化在一个数量级内均可视为没有变化,因此,当一个HBV DNA PCR定量检验结果为7.2E+08拷贝/ml的乙肝患者,在抗病毒药物如拉米夫啶或干扰素治疗,2周后,再检测,如结果为5.2E+08拷贝/ml,再2周后,结果为9.0E+08拷贝/ml,结果在一个数量级范围内变化,说明结果没有变化,抗病毒治疗无效果。7.2E+08为7.2X108的意思。
 
    乙肝病毒的抗病毒治疗效果的判断可以采用PCR方法动态检测患者血循环中HBV DNA,当患者经抗病毒药物治疗后,HBVDNA含量持续下降,然后维持在低水平,或低至方法能检出的含量(测定下限)以下,则说明治疗有效。观察抗病毒药物治疗效果不能凭二三次检测结果来判断,必须多次动态观察,每次检测的间隔日数不宜太短,一般为2周左右。因为到目前为止,人类对于病毒直到现在仍没有找到有效的杀灭方法,只能是用抑制病毒的药物如拉米夫定等治疗。而HBV一旦感染机体,即体内将终生携带该病毒,不可能出现所谓的“转阴”,使用PCR没有检出来,只是说明血液中病毒的含量低于所用方法能检出的量而已。
Tags:可靠,方法,乙肝,判断,检测,HBVDNA,HBV,病毒,阳
责任编辑:何辉

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