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利用ELISA定量测定结合的噬菌体

时间:2011-12-16 23:33|来源:实验室前沿| 分享|点击:


器材与试剂的准备

洗涤缓冲液
结合缓冲液
辣根过氧化物酶(HRP)连接的抗M13单克隆抗体(mAb)  (Amersham Biosciences)   
HRP底物㈠OPD(邻苯二胺,o-phe-nylenediamine)  (Sigma)或ATBS  【2,2-连氮基-双-(3-乙基苯并噻吡咯啉-6-磺 酸),2,2’-azinobis(3-ethylbenzothiazo-line-6-sulfonic acid)】  (Kinkegaard和Perry)
预先准备的噬菌体包被的微孔板
 
[方法]
1,每块板用洗涤缓冲液洗涤3次。
2.用结合缓冲液将HRP联结的抗M13单克隆抗体做1:5000稀释,每孔加入100ul,室  温下孵育30分钟。
3.每块板用洗涤缓冲液洗涤3次。
4.每孔加入lOOglOPD显色,不超过15分钟后用50ul 2.5mol/L的HzS04终止反应。
5.检测每块板在492nm处的吸光度。
Tags:结合,噬菌体,测定,定量,ELISA,利用,
责任编辑:何辉

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