如果不使用化学发光物，推荐用此法对印迹膜染色(Hancock和Tsang 1983)。该法价廉、可靠、灵敏并可得到永久记录，特别适用于放射性标记抗体的染色。更重要的是它不影响后续抗体与抗原的结合(Glenneyl986)。若需复染印迹膜时，应首选此法。但由于有色反应产物之间缺乏反差以及对化学发光的干扰，印度墨汁不适合用于呈色反应的酶检测法。
本文来自实验室前沿
着染的原理是印度墨汁中的胶状碳粒易于和印迹膜上的固定蛋白质发生黏附所致。因此，必须正确使用印度墨汁。PelikanFount印度绘画墨汁(原始配方，黑色)或其替代物均适用。
1．所需试剂
0．03％吐温20／PBS；印度墨汁混悬液(0．1％印度墨汁溶于0．3％吐温20／PBS)；PBS。
2．操作步骤
(1)用0．3％吐温20／PBS洗印迹膜，每次用100ml洗5mia，更换2次。
(2)将印迹膜放入墨汁溶液内(100t~l墨汁溶于100ml 0．3％吐温20／PBS中)。
(3)室温下孵育15min一18h。延长孵育时间可提高灵敏度。
(4)反复多次用PBS清洗、脱色。
至此硝酸纤维素膜可用于封闭和加入抗体
3．常见问题
印度墨汁不能和化学发光物合用，应改用丽春红S。若是使用呈色反应的酶检测法时，印度墨汁的黑色会使凝胶难于拍照。这时，可改用其他检测方法或换用丽春红S。另一办法是在完成检测步骤后再对印迹膜进行染色。使用不含蛋白质的封闭缓冲液(如吐温)效果较好。
