[器材和试剂]
● 噬菌体缓冲液
● XLl-Blue TB细胞
● LB-琼脂培养基+Amp/G1u平板
● LB+Amp；
● M13K07辅助噬菌体(Amersham Biosciences) 、
● IPTG
[方法]
1．用巴氏吸管从单个噬菌斑中挑取噬菌体，并转移到装有200ul噬菌体缓冲液的微量管中。
2．70℃加热20分钟，再离心30分钟以除去噬菌体上清液中的细菌。
3．用稀释的含噬菌体的上清，感染X11-BlueTB细胞。噬菌体上清可于4℃保存。
4．无搅动孵育15分钟，然后在37℃下剧烈振荡孵育30分钟。
5．铺在LD-琼脂培养基+Amp/G1u平板上，37℃孵育过夜。
6．在2m1 LB+Amp培养液中接种单个菌落，并在37℃下剧烈振荡孵育(>350r/min)，直到细胞密度达到OD600＝0．25。
7．37℃下极温和搅动孵育15分钟。
8．用辅助噬菌体M13K07(moi＝30)超感染，并加IPTG(终浓度为0．1mmol/L)，温和混合10分钟，而后37℃下剧烈振荡孵育5小时。
9。将培养液转移到微量管中，以最大速度离心30分钟除去细菌；并在4℃保存噬菌体上清。其滴度一般高于1×1010TU/m1。
