筛选多肽的操作步骤的规程和方法。第一天 以0.1M NaHCO3（pH 8.6）制备100mg/ml的靶分子溶液。如果需要稳定靶分子，可以用含有金属离子的相似离子强度缓冲液。 在每孔内加入1.5ml靶分子溶液，重复涡旋直至表面完全湿润（这一步要多注意，尽量避免溶液形成液...[阅读全文]

NK细胞的效应功能 1．杀伤肿瘤细胞 对持续产生的恶变细胞，及时地予以识别和清除至为重要。这方面，除了淋巴细胞，固有免疫的作用不容忽略，其中NK细胞的作用尤为突出。与T细胞不同，分布于全身的NK细胞可以绕过TCR／CD3识别途径，以MHC非限制性方式迅速地识...[阅读全文]

【材料和试剂】 （1）真空泵 （2）PEG/NaCl溶液 （3）碘化物缓冲液 （4）70%乙醇 （5）TE缓冲液 10mM Tris-HCl，pH 8.0； 1mM EDTA 【操作步骤】 （1）扩增噬斑（见上述），在第一次离心后，将500ml含有噬菌体的上清转入新的离心管中。 （2）加入200ml PEG/N...[阅读全文]

蛋白质鉴定意味着将实验测定的蛋白质性质和可以利用计算机手段从一个数据库得到的蛋白质性质进行比较。考虑到这些不同的性质，已经开发了一大批蛋白质鉴定工具，如氨基酸组成、序列标签或质谱衍生的数据等，所有的这些工具都是通过与蛋白质数据库中的某一个...[阅读全文]

免疫染色技术可对细胞表面多种蛋白进行检测，其固定步骤大致相同。为观察细胞表面抗原，需要改进的有两点：一是抗体结合的部位，二是怎样提高灵敏度。 这种改进的目的之一是防止细胞溶解，可以确保抗体不进入细胞内，因为细胞内存在未处理的抗原或潜在的交叉...[阅读全文]

IIF及ELISA是常用的检测技术。以Hep2细胞为抗原基质的IIF法荧光着染特点是核浆呈不同程度着染，其中约50％细胞核呈阳性，其余为阴性。...[阅读全文]

蛋白印迹法检测技术(immunoblottingtest，IBT)亦称酶联免疫电转移印斑技术(enzyme linked immunoelectrotransfer blotting，EITB)，因与Southern早先建立的检测核酸的印迹法Southernblot(DNA印迹法)相类似，亦被称为Westernblot。 Western印迹法是将蛋白质借...[阅读全文]

PAP法，也称为非标记抗体酶法（unlabelled antibody enzyme method）。此法不用任何化学交联剂处理酶和抗体，二者活性不受化学反应的改变和损伤，从而可使免疫酶法的灵敏度大为提高，常用于ELISA和免疫组织化学染色。 PAP制备的基本原理：抗体与相应抗原在一...[阅读全文]

1．杂交瘤细胞的冻存 及时冻存原始孔的杂交瘤细胞每次克隆化得到的亚克隆细胞是十分重要的。因为在没有建立一个稳定分泌抗体的细胞系时，细胞培养过程中随时可能发生细胞的污染、分泌抗体能力的丧失等等。如果没有原始细胞．的冻存，则可因上述意外而前功尽...[阅读全文]

将微孔表面包被纯化的肺炎支原体抗原，将被稀释过的患者血清加入微孔中，如存在支原体抗体可与微孔上抗原相结合，然后洗去未结合物质，再加入酶标记抗人IgM与抗原抗体复合物结合，洗去未结合的酶标记抗体，最后加入显色液。在特定时间终止显色反应，通过酶标...[阅读全文]