血清学诊断方法是目前旅毛虫病临床选择的主要辅助诊断方法。用不同的分子生物学方法在动物屠宰前取血样检测旋毛虫抗体，或在动物屠宰后取肉汁检测组织液或残留血中的旋毛虫抗体，亦可检测肉汁中的旋毛虫抗。原，即旋毛虫的排泄—分泌物抗原(ES抗原)。由于在血循环中抗原的半衰期短于抗体，抗原阳性表明肉中有活的旋毛虫存在，抗体阳性表明该动物曾感染过旋毛虫，故检测抗原优于检测抗体。
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(1)皮内试验(1D) 方法简便、快速、敏感性高，但特异性较差。患者常在感染后2周出现阳性反应，阳性率达90％，3周以上可达96．3％；感染后数年，甚至20年仍可呈阳性反应。但与其他蠕虫感染有一定的交叉反应，正常人有4．1％～7．4％的假阳性反应。
(2)环蚴沉淀试验(CLP) 是用含有特异性抗体血清孵育幼虫，可在虫体天然孔周围出现泡沫样或颗粒状沉淀物。用脱囊蚴与待检血清一起孵育，阳性率可达97．6％。此法敏感性较高，特异性较好，可检出轻度感染和做早期诊断，但活虫来源较困难。改用冻干幼虫，可提高实用价值。
(3)间接荧光抗体试验(1FA) 间接荧光抗体试验较早用于诊断旋毛虫病，优点是制备的荧光标记抗体，可以用于多种抗原、抗体系统的检测。初期用全虫作抗原，用试管法检测后发展为用虫体或带虫肌肉切片作抗原。但是该方法需要配备荧光镜，使其应用范围受到限制。
