成纤维细胞生长因子(fibroblast growthfactor,FGF)可促进多种细胞分裂和血管生成、诱导内皮细胞趋化及调节细胞代谢,其作用没有种属特异性。可选用3T3细胞、肾上腺皮质血管内皮细胞、人脐带静脉内皮细胞、BHK-21细胞及牛动脉内皮细胞(AEC)等作为检测FGF促细胞增殖作用的靶细胞。 copyright sysqy.com
1.于12孔细胞培养板每孔中加入1×104/0.5mLAEC或3T3细胞。
2.用含0.2%明胶的PBS系列稀释待测样品,每孔加0.5mL稀释样品,以后隔天更换同样浓度的稀释样品,对照孔加0.5mL细胞培养液,置37~C,5%C02条件下培养4d。
3.采用MTF法、3H-TdR掺人法或直接计数法检测生长的细胞,绘制剂量反应曲线,取能诱导50%最大增殖反应的最高样品稀释度为IUFGF。