胶体金制备好后,应进行颗粒直径的测定及金颗粒间大小的均匀度鉴定。
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1.胶体金颗粒直径测定
用预先处理好的覆有Formvar膜的300目镍网浸入胶体金溶液内,取出放在空气中干燥或37℃烤干。于透射电镜下观察其颗粒大小及均匀度,计算平均直径。如电镜放大10万倍,照片放大2.5倍,则10万×2.5=250000=25nm。理想的金颗粒大小基本相等,均匀一致,无椭圆形及多角形的金颗粒存在。
2.胶体金颗粒均匀度的测定
一般需测量100个以上的胶体金颗粒,然后用统计学处理,计算胶体金颗粒的平均直径及标准差。
3.影响胶体金颗粒大小的因素
如果总数超过10%以上大小不等的金颗粒及椭圆形、三角形金颗粒存在,应重新制备。其原因如下:
①还原剂不是一次快速加入;
②容器太大或太小,及在100℃加温时间超过15min;
③在室温或4℃保存太久;
④低温保存。