Bcl-2原癌基因被认为是哺乳动物细胞凋亡过程中的负调控剂。本法采用鼠抗Bcl-2单克隆抗体，可通过免疫组化或免疫细胞化学的方法用于检测组织或细胞中的Bcl-2，或者通过Western blots检测细胞粗提物。 copyright sysqy.com
【样本来源】
（1） 离心细胞；
（2） 细胞涂片、冰冻或石蜡包埋组织切片；
（3） 细胞粗提物。
【材料与试剂】
（1） 鼠抗Bcl-2单克隆抗体；
（2） 碱性磷酸酶－抗碱性磷酸酶（APAAP）；
（3） PBS缓冲液
【操作步骤】
（1） 标本固定：用丙酮或甲醇将标本（冰冻组织切片或新鲜组织涂片）固定于玻片上，－20°c，10分钟；
（2） 抗Bcl-2抗体（1：40～1：80）室温孵育1小时；
（3） PBS洗三次；
（4） 用抗鼠抗体（桥联抗体）室温孵育1小时；
（5） PBS洗三次；
（6） 在APAAP溶液中孵育，室温30分钟；
（7） PBS洗三次；
（8） 加入Fast Red 底物直到出现明显的红色；
（9） 以苏木素复染、封片、观察结果；
【结果判断】
Bcl-2蛋白显红色。
【注意事项】
Western blot方法中抗Bcl-2抗体与26KD的Bcl-2原癌基因产物结合。在离心细胞、细胞涂片、冰冻组织切片，抗体可与Bcl-2蛋白中的41－54位氨基酸结合。在常规固定的石蜡包埋组织切片中，由于抗原表位被封闭，因此抗体仅与较少量细胞反应。
