实验室前沿——做中国最专业实验室前沿资讯网

现在的位置:主页 > 实验技术 > 医学实验室 > 病理室 >

免疫组织化学所用的封片剂

时间:2010-10-20 03:23|来源:实验室前沿| 分享|点击:


 免疫化学所用的封片剂必须与检测方法相协调。一般包括两类封片剂:水溶性和非水溶性。适合于水溶性的封片剂是Gelvatol或Mowiol。如果不适用,可用甘油代替,但不能长时间保存。非水溶性的封片剂是DPX,电子显微镜所用的商品化DPX亦有效。DPX是以其成分来命名的,配方为10gDistyrene 80、5ml二丁基邻苯二钾酸盐和35ml二甲苯。 本文来自实验室前沿

 
    1.DPX
    (1)样品如果用DPX封片,必须通过系列乙醇脱水,在75%乙醇中放置3min/次;无水乙醇3min,2次,空气中干燥。
    (2)加一小滴DPX至标本上,如果样品是在载玻片或组织培养皿上,小心放一张盖玻片在此小滴上,避免产生气泡。如果样品是在盖玻片上,将盖玻片倒放在一张干净的载玻片上(样品面向下)。
    (3)用纸巾去除多余的封片剂。
此样品可直接放置,而且可对标本进行观察并照相。
 
    2.Gelvatol或Mowiol
    (1)准备Gelvatol或Mowiol:取2。4gGelvatol 20~30或Mowiol 4—88加到6g甘油中,搅拌混合,加6ml水,在室温放置数小时,加12ml 0.2mol/LTris(pH8.5)并加热至5012 10min,偶尔混合。Mowiol或Gelvatol溶解后,通过5000g离心15min使其澄清。用于荧光检测,加1,4—重氮基环—[2,2,2—辛烷(DABCO)至2.5%,以防止褪色,分装在密封的容器内,并贮存于—20C。这类封片剂在融化后置室温数周内仍保持稳定。
    (2)Gelvatol和Mowiol可直接用于洗涤后的染色标本。
    (3)加一小滴封片剂至标本。如果样品是在载玻片或组织培养皿上,小心放一张盖玻片在小滴上,避免产生气泡。如果样品是在盖玻片上,将盖玻片倒放在一张干净的载玻片上(样品面向下)。
    (4)用纸巾去除多余的封片剂。
    封片剂需放置过夜,再加一小滴亮油于盖玻片的边缘,直接用于观察。此样品可观察和照相。组织免疫染色的实验结果应该保存在底片或录像带上。酶或金标试剂的标本照相较容易。
Tags:所用,化学,组织,免疫,封片剂,样品,
责任编辑:何辉

最新更新

点击排行

更多阅读者

其他人正在阅读