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胶体金免疫金银组织化学技术

时间:2010-04-24 03:03|来源:实验室前沿| 分享|点击:


Kausche等(1939)烟草花叶病毒吸附到金颗粒上,在电镜下观察金离子呈高电子密度。然而胶体金技术作为标记物应用于IHC是由Fauld和Taylor(1971)在《免疫化学杂志》上报道了应用胶体金标记抗沙门菌抗血清,检测细菌表面抗原,并在电镜下看到在细菌抗原—抗体结合部位上的胶体金颗粒。他们的这一研究成功地为免疫金技术的发展奠定了基础。胶体金能稳定又迅速地吸附蛋白质,而蛋白质的生物活性没有明显的改变,并从电镜水平过渡发展到光镜水平的应用。胶体金可以作为探针进行细胞表面和细胞内多糖、糖蛋白、蛋白质、多肽、抗原、激素及癌基因蛋白等生物大分子的精确定位。其优点可列举数十条,例如: 内容来自实验室前沿网站

 
    ①胶体金溶液可以重复制备,其颗粒大小可以控制,可较容易进行免疫电镜的双重或多重标记;
    ②金标探针有很高的电子密度,有特殊的分辨率,定位准确;
    ③金标探针能发射二次电子和反射电子,是扫描电镜目前最理想的标记物;
    ④金标探针与组织细胞内的抗原结合后,可用银增强,大大提高了IHC的敏感性,是目前最为敏感的IHC方法之一;
    ⑤免疫金银染色方法无致癌性,使用较安全。
 
    胶体金技术是以胶体金作为一种标记物。胶体金是指金的水溶胶,它具有一般溶胶的特性。溶胶是指一种物质以或大或小的微小粒子分散在另一种物质中所形成的体系。被分散的物质叫分散相,容纳分散相的另一种物质称为分散介质。
 
    根据分散相质点的大小不同,可将分散系分为三大类。
    (1)离子分散体系  是指分散相以小分子(1nm以下)或离子状态存在,具有高度的稳定性,无论放置多久,分散相颗粒都不会因重力而下沉,不会从溶液中分离出来。
    (2)胶体分散体系  是指分散相颗粒直径在1~100nm之间的分散体系。其外观透明,不浑浊,在普通显微镜下看不到它的分散粒子,不易受重力影响与分散介质分离沉降,但其中的溶胶粒子有聚结变大的倾向,即具有聚结不稳定性。
    (3)粗分散体系  分散相颗粒是由许多分子组成,因粒子较大,用肉眼或显微镜即可见,其特点是不稳定,常因重力而自动沉降,外观浑浊不透明。
Tags:技术,化学,组织,金银,免疫,分散,颗粒,标记,体系,电子,
责任编辑:何辉

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