野生型p53蛋白可以通过诱导凋亡而抑制肿瘤的生长，突变型p53基因丧失了诱导细胞凋亡的能力，从而增强了细胞的恶性转化能力，而且在恶性肿瘤常可检测出突变型p53基因。p53蛋白也可能参与化疗药物诱导的细胞凋亡。本法运用一步夹心免疫法，定量检测野生型或突变型p53蛋白。 内容来自实验室前沿网站
【样本来源】
（1） 人、鼠、兔的组织切片
（2） 肿瘤细胞株
【材料与试剂】
（1） 过氧化物酶标记的多克隆抗人-p53全抗体（检测抗体）；
（2） 洗涤缓冲液（10x）；
（3） 过氧化物酶底物液： 四甲基联苯胺（tetramethylmenzidine， TMB）液。
（4） TMB终止液；
（5） 孵育缓冲液；
（6） 链霉亲和素与生物素化抗p53抗体（捕捉抗体）包被的微孔板。
【操作步骤】
（1） 制备标本（如细胞裂解液或组织匀浆），离心10，000xg，10分钟；
（2） 将离心后的上清液（水相）加至链霉亲和素与生物素化抗p53抗体预先包被的微孔板；
（3） 加入抗-p53-过氧化物酶（1：15）室温孵育2小时；
（4） 室温，用1x洗涤缓冲液洗板5次，每次1分钟；
（5） 加入过氧化物酶底物液，室温孵育，10-20分钟；
（6） 加入TMB终止液，室温反应1分钟，测定450nm吸光度；或直接测定370nm的吸光度。
【结果判断】
P53蛋白的含量与显色反应的强度成正比。
