彩色免疫金银染色方法(coloured IGSS，CIGSS)是由Frite和Hoenes等(1986)建立的一种新方法，刘彦仿等(1988)在《中华病理学杂志》上也报道了改进后的CIGSS方法。其基本原理是在IGSS法的基础上，根据洗彩色照片的显影原理而发展起来的，即IGSS后，在抗原位点处生成的银颗粒经铁氰化钾与溴化钾的氧化反应，将银颗粒氧化成溴化银，后者与彩色显影剂起还原反应，生成金属银，而彩色显影剂本身则被氧化，其氧化产物使彩色成色剂由五色变成有色的染料，并沉积在银颗粒的部位，金属银变成了银离子。由于染料只能通过彩色显影剂沉积在有银的部位，不会发生非特异性背景染色。
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一、操作步骤
(1)石蜡切片常规脱蜡至水。
(2)0．1％胰蛋白酶37℃消化20min，或抗原修复20min(98℃)，自然冷却至室温。
(3)0．05mol/L(pH7，4)TBS洗3×3min。
(4)1％EA(卵蛋白)15min，不洗。
(5)适当稀释的特异抗体室温4h或4℃孵育20h，或37℃孵育1h。
(6)0．05mol/L(pH7．4)TBS洗3×5min。
(7)0．02mol/L(pH7．4)TBS(内含0．1％BSA)洗10min。
(8)1％EA 15min，不洗，1：10—1：20稀释的PAGlonm室温孵育1h，或37℃孵育30min。
(9)0．05mol/L(pH7．4)TBS洗10min。
(10)1％戊二醛洗10min。
(11)双蒸水洗5min。
(12)l％明胶洗5min。
(13)银避光显影(见银显影剂配方)8～15min
(14)双蒸水洗15min。
(15)固定：用显影定影液(1；4或1：10)固定5min，也可以用15％硫酸钠—20％硫代硫酸钠混合液固定1—3min，或用1％戊二醛固定5rain，温水洗3～6min。
(16)漂白：用2％铁氰化钾和1％溴化钾洗10min，双重蒸馏水洗5rain。
(17)彩色显影：用。—萘酚或菲尼酮或碱性品红显色2—4min，双重蒸馏水洗5～10min。
(18)固定：2％硫代硫酸钠和1％亚硫酸钠洗Stain。
(19)流水冲洗。
(20)缓冲甘油封片，观察。
二、CIGSS的优点
(1)阳性结果比黑色更鲜明。
(2)可以使弱信号得到进一步放大。
(3)可部分消除IGSS背景染色。
(4)信号/背景比值高。
(5)是开展IHC双重或多重标记的新途径。
