免疫金银染色(immunogold silver staining;IGSS)的基本原理是通过免疫反应沉积在抗原位置的胶体金颗粒起着一种催化剂作用,用对苯二酚还原剂将银离子(Ag+)还原成银原子(Ag),被还原的银原子围绕金颗粒形成一个“银壳”,“银壳”一旦形成本身亦具有催化作用,从而使更多银离子还原并促使“银壳”越长越大,最终使抗原位置得到清楚放大。 内容来自实验室前沿网站
用银增敏示意图
该方法只有在抗原存在的情况下,才有金颗粒并促使银壳的形成。没有抗原区域就没有抗原—抗体反应,也就不会有颗粒存在,银离子与对苯二酚的反应则很慢,这样光镜下就能看到抗原—抗体反应部位呈黑色或黑褐色。IGSS方法可提高抗原—抗体反应部位金颗粒的可见度,它是一种简便、特异而敏感的方法。
IGSS可分直接法、间接法和搭桥法。
免疫金银染色间接法 免疫金银染色搭桥法
Ag-抗原;Ab-特异抗体;Gab-金标记抗体 Ag-抗原;Abl-特异性一抗;Ab2-桥联抗体
GP-金粒;SP-银沉淀 Ab3-G-金标抗体;GP-金颗粒;SP-银沉淀