肺标本多采用灌注固定的方法：
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大鼠肺组织制片方法的改进
尚宏伟 李宝红 王兴翠 曾晓蓓 郭崇洁
肺为含气器官，固定液难以渗透。目前采用的气管灌注固定法虽然在一定程度上克服了传统的浸泡固定法、血管全身灌注固定法导致的肺泡萎陷、肺组织结构不清等缺点，但仍存在肺淤血和肺泡腔红细胞污染的弊端［1，2］。作者经过反复实验发现先结扎气管后迅速断头放血，再行气管灌注固定，可收到理想效果。
1 材料和方法
Wistar成年大鼠2只，体质量(300±10) g；2%戊巴比妥钠(2～3 mL/kg)腹腔麻醉；剪开颈部皮肤，暴露气管并用手术缝合线在其下1/3处结扎，迅速在颈部上1/3处断头放血后快速将胸腔打开取出全肺；生理盐水冲洗肺外表并放入洁净平皿内，用装有SuSa固定液的注射器从结扎气管线下刺入管腔内缓慢注入固定液(此时气管开口应朝上方以防液体流出)，待整个肺的下3/4膨胀，停止注入并用手术缝合线于针口下将气管结扎；将全肺投入SuSa固定液内浸泡固定24 h后用含碘酊的90%乙醇脱汞24 h，其间经常添加碘酊至红葡萄酒色；再入90%乙醇浸泡24 h后修块，修块时尽量取靠近肺门处组织。再入95%乙醇和无水乙醇脱水，二甲苯透明，石蜡包埋。石蜡切片4 μm，HE染色，树胶封片。
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2 结果和讨论
由比较可见，间皮被覆于肺细胞表面未见血细胞粘附。肺泡充盈适度，各级肺内支气管及肺泡囊管壁结构完整；肺组织形态、结构清晰，肺泡无塌陷及破裂；肺泡隔内毛细血管清晰可见，无淤血表象。肺泡腔内清澈透明，无红细胞聚集，肺泡壁Ⅰ型和Ⅱ型细胞排列整齐，清晰可见。
固定是制作高质量的组织标本很主要的步骤之一。由于肺是含气组织，在浸泡固定时往往漂浮在液面上难以达到组织迅速固定的目的。为此，人们曾采用了各种改良办法，试图防止肺泡萎陷和破裂，使肺组织结构清晰，但仍不能避免断头时直接从气管吸入肺内的血污染肺泡，也不能杜绝肺淤血所致的肺泡壁增厚。我们的方法可减轻肺组织淤血，防止残血被气管重吸入肺，造成人为污染。全肺浸泡固定先用生理盐水洗净肺表面血污，可使组织清晰美观，结构清晰可见。此方法制作的肺标本切片质量好，适用于教学和科研。
作者单位：首都医科大学组织胚胎学教研室
参考文献
1 杜卓民.实用组织学技术.北京:人民卫生出版社,1998.191～192
2 陈佛痴,朱秀雄.组织学方法.吉林:吉林人民卫生出版社,1964.247～249 copyright sysqy.com
