需要的器材和试剂 L8M Beckman超速离心机或与其相当的机型 吊桶式SWTi4l转头或相当类型 氯化铯(Sigma) PBS 纯化的噬菌体样本 使用方法 1．在每毫升最后的噬菌体悬液(例如来自实验方案13．11)中，加入0．45 g氯化铯，充分混匀至溶解。 2．用吊桶式转头 (或与...[阅读全文]

目前尚无公认的标准化的测定方法，常用的有： (1)蛋白质印迹法：经SDS-PAGE分离牛或人CNS髓磷脂，将蛋白质转印至硝酸纤维素膜，而后与稀释的检测血清孵育，洗涤后加入辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgM，经二氨联苯胺染色；或者依次加入一抗(兔抗人IgM)，二抗(...[阅读全文]

(1)受体检测：促甲状腺激素结合的抑制性免疫球蛋白(TBll)，抑制125I-TSH与甲状腺膜结合是检测TSHR抗体的基本原理。以待测血清中的抗体与125I-TSH竞争结合TSHR，然后测定结合上的125I-TSH量，即可计算出竞争结合的TSHR抗体量。此外还有ELISA检测TSHR抗体。 (2...[阅读全文]

免疫沉淀的实验过程比较简单，一般分为3个阶段；①抗原溶液的制备；②裂解物非特异性本底的预处理；③免疫复合物的形成与纯化。 免疫沉淀的第一步是制备抗原溶液。任何抗原溶液均可作为免疫沉淀的材料来源，但免疫沉淀一般采用细胞或组织制备的裂解物。裂解...[阅读全文]

有若干种方法常用于提高免疫印迹的灵敏度。一种是在电泳之前应用免疫沉淀法将抗原进行纯化和浓缩(见前)。该法可浓缩极低浓度的抗原，并可在电泳和免疫印迹之前将其与无关的蛋白质分离，使对极低浓度抗原的研究成为可能。提高检测灵敏度的其他方法都是针对增...[阅读全文]

1．准备工作 该检测是在96孔微板上进行，每孔均先用链霉亲合素包被，分别依次加入待进行表位作图的肽系列，并用需定位的抗体检测。 2．试剂和溶液 0．1％PBS-Tween； 2％BsA／PBS； 0．1％(wt／v01)BSA／PBS； 肽； 过氧化物酶标记的第二抗体； TMB底物(取50...[阅读全文]

患有烈性传染病并最终康复者，保护性免疫的持续时间可达60～?o年，有的终身免疫。疫苗接种后(例如天花疫苗)，特异性抗体及记忆性细胞也据称可维持数十年。这些都提示，抗原特异性记忆细胞在体内可以长期存在。其中的机制尚未完全阐明，现有的解释包括两个方...[阅读全文]

一、非特异性染色的主要因素 组织的非特异性染色的机理很复杂，其产生的原因主要可分为以下几点： （1）一部分荧光素未与蛋白质结合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。 （2）抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白，可与组织成分结合。...[阅读全文]

抗红细胞抗体(RBC抗体)于1904年由Donatht和Landsteiner首次报道，是人体内第一个被阐明的自身抗体，现称为DonathLandsteiner(DL)抗体。共分为温抗体(WAS)、冷凝集素抗体(CAs)、DL抗体三大类。该抗体能引起自身免疫性溶血性贫血(AHA)。 1966年Bussard发现，从...[阅读全文]

LMA、LSP抗体以及后来的ASGPR抗体都被当作致病原和临床标志物研究。可采用IIF检测LMA，肝细胞膜上出现环形荧光模式。26kD蛋白质的发现并没有发展出一种更为简便的方法来检测LMA。LSP抗体的检测手段是放射免疫分析法。 ASGPR抗体在不同实验室采用不同方法检测...[阅读全文]