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  • [免疫室] 特异性循环免疫复合物的检测

    特异性CIC分为单特异性CIC和双特异性CIC两类。前者适用于检测已知抗原及其相应抗体组成的CIC。双特异性CIC是指对组成CIC的抗原、抗体和补体中某两种成分组合明确的CIC,常采用的检测方法为ELISA和RIA技术,需要两种特异性各异的抗体。因此,检测要求条件较高...[阅读全文]

  • [免疫室] 微量滴定板中组织可溶性SCFv ElISA

    实验使用器材: ● 9E10单抗(SantaCruzBiotech) ● PBS ● PBS/0.1%Tween 20(PBS/Tween) ● 4%MPBS ● 抗小鼠HRP标记抗体(例如Sigma目录号A2554) ● 含有抗体片段的上清 [方法] 1.按每孔100pl蛋白抗原包被微量滴定板,4℃过夜。PBS中10ug/m1的浓度是...[阅读全文]

  • [免疫室] 平板法单向扩散试验的简易定量技术

    平板法单向扩散试验此法由Mancini于1965年提出,是目前最常用的简易抗原定量技术,其要点是:将抗体或抗血清混入o.9%琼脂糖内(约50℃),未凝固前倾注成平板,凝固后在琼脂板上打孔(一般直径为3~5mm),孔中加入抗原溶液,放室温或37℃让其向四周扩散,2448...[阅读全文]

  • [免疫室] 免疫放射分析(IRMA)的基本原理

    免疫放射分析(IRMA)是在放射免疫分析(RIA)的基础上发展起来的核素标记免疫测定,其特点为用核素标记的抗体直接与受检抗原反应并用固相免疫吸附剂作为B或F的分离手段。IRMA于1968年由Miles和Heles改进为双位免疫结合,在免疫检验中得到了广泛应用。 IRMA属固...[阅读全文]

  • [免疫室] 肝纤维化四项检测作业指导书

    项目名称:肝纤维化四项 项目简介: 肝纤维化四项包括HA(透明质酸)、LN(层粘蛋白)、PCⅢ(Ⅲ型前胶原)、Ⅳ型胶原四个检测指标。 HA由间质细胞合成,参与形成蛋白聚糖多聚体,是结缔组织基质的主要成份,主要反映肝脏内皮细胞功能和肝纤维化、肝硬化的轻...[阅读全文]

  • [免疫室] 免疫亲和层析柱上洗脱抗原方法

    实际上,从免疫亲和层析柱上洗脱抗原很快且较容易。大多数工作是花费在设计和用于摸索各种有效的洗脱条件。可以采用三种方法进行洗脱,以阻断抗原抗体之间的相互作用:①用较强烈的条件处理;②加入模拟结合位点的饱和量小分子化合物,和/或③使用一种能引...[阅读全文]

  • [免疫室] 聚丙烯酰胺凝胶薄片的放射活性测定

    聚丙烯酰胺凝胶薄片 35 S、 14 C或 3 H的放射活性测定 1.用自显影X线胶片作模板,切下含放射性目的蛋白的凝胶片段,已经干燥但尚未固定的凝胶很容易操作。 2.将凝胶薄片放入放射性计数小瓶中。 3.用最小量的水(20u1/1X 5mm薄片)膨胀凝胶薄片(室温30min)...[阅读全文]

  • [免疫室] 凝胶铜染法

    凝胶铜染法是传统的考马斯亮蓝或银染法的替代染色方法。将凝胶在氯化铜(CuCl2)溶液中温育,在Tris和SDS同时存在时可形成明显的白色不透明沉淀物。蛋白条带仍然清晰,留下一个多肽分离模式的负染图像。蛋白未结合在凝胶上,可通过EDTA螯合剂去除Cu离子而得以...[阅读全文]

  • [免疫室] 凝胶固定法与干燥法

    凝胶固定法 在很多实验中,电泳分离的蛋白质需要将其沉淀或结合在凝胶内,这类技术统称为固定。各种浓度和厚度的凝胶都可用酸或醇类固定。通常是在室温下将凝胶浸入12.5%三氯乙酸或脱色剂(70%乙酸和25%的甲醇)内。如果用溴酚蓝作为示踪剂,它亦可作为pH...[阅读全文]

  • [免疫室] 吸附法分离与纯化蛋白质

    在蛋白质的提纯方法中,选择性吸附也是应用历史较久迄今仍在广泛采用的方法之一。早期工作常用高岭土(我国的一种土质,其分子式大致是AL2O32SiO22H2O)、氧化铝(AL2O3)及活性炭等吸附剂,由于这些吸附剂吸附力较弱,或者易引起蛋白质变性而应用不广,现已...[阅读全文]

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