在免疫学研究中，常选用以下的几种实验动物： （一） 大鼠 ：大鼠对绵羊红细胞和牛r球蛋白的免疫反应有品系差异。大鼠有抗体IgE，蠕虫感染常能诱发大量的IgE抗体，它们存在于血液循环中，常规的免疫法只能使大鼠产生少量的抗体，在体内存在的时间较短。百日...[阅读全文]

在宿主细胞过量的情况下，噬斑的数量随着噬菌体的增加呈线性增加。由于这个原因，在感染以前，要将噬菌体进行稀释，而不是将宿主细胞稀释。以低MOI（感染重复性）铺板，也可确保每一个噬斑仅包含一个DNA序列。 【材料和试剂】 （1）微波炉 （2）LB/IPTG/Xgal...[阅读全文]

免疫荧光单标记方法 免疫荧光单标记是指只标记一种蛋白质分子，方法比较简单，只要按照染色步骤去做，通常不存在太多的问题。但要注意固定液的选择，固定液选择的合适与否，可能会直接影响染色结果。具体染色方法如下。 1)所需材料与试剂 (1)培养在盖玻片或...[阅读全文]

蛋白质组学研究主要依赖于大规模高通量分离和分析技术的进步，目前最成熟、最有效的技术仍然是双相凝胶电泳分离生物质谱鉴定技术，即首先用双相凝胶电泳分离纯化蛋白质，结合计算机软件分析得到电泳图谱，再进一步用生物质谱技术对分离出的蛋白质进行鉴定，...[阅读全文]

酵母双杂交系统是在真核生物酵母中研究活细胞内蛋白质相互作用的技术，具有很高灵敏度，对蛋白质之间微弱和瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测到。酵母双杂交系统的建立基于对真核生物调控转录起始过程的认识。细胞起始基因转录需要有反式转...[阅读全文]

对分离的蛋白质进行鉴定是蛋白质组研究的重要内容，蛋白质微量测序、氨基酸组成分析等传统的蛋白质鉴定技术不能满足高通量和高效率的要求，生物质谱技术是蛋白质组学的另一支撑技术。 生物质谱技术在离子化方法上主要有两种软电离技术，即基质辅助激光解吸电...[阅读全文]

考马斯亮蓝染色法标准方法 1．电泳后，将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的0．25％考马斯亮蓝R250(溶解于50％甲醇和10％乙酸中)。 2．室温下振摇温育4h至过夜。 3．去除染色液，收集保存可重复使用20～40次。 4．依次在25％甲醇、7．5...[阅读全文]

1．电泳或染色后，将凝胶置于脱色剂(7％冰乙酸，25％甲醇)中振摇脱色30rain。仔细倒去脱色剂，然后在DMSO废液中清洗，空干，再加入5倍胶体积的DMSO废液。 2．室温下振摇温育45rain，弃去DMSO废液，加入5倍于凝胶体积的新鲜DMSO。 3．室温下振摇温育45min，然...[阅读全文]

[器材和试剂] 1.L8M Beckman超速离心机或与其相当的机型 2. 吊桶式SWTi4l转头或相当类型 3. 氯化铯(Sigma) 4. PBS 5. 纯化的噬菌体样本 [方法] 1．在每毫升最后的噬菌体悬液(例如来自实验方案13．11)中，加入0．45 g氯化铯，充分混匀至溶解。 2．用吊桶式转...[阅读全文]

[器材和试剂] 1.用于细菌培养的无菌96孔圆底微量滴定板，如Nune 62162(可自VWR购得) 2. 2TY/amp/glu培养基 3. 含30％甘油的2TY/amp/glu培养基(2TY/amp/glu/gly) 4. 2TY/amp/kan培养基 5. 选自铺板培养或抗体文库选择的克隆株 [方法] 1．用无菌牙签挑取单个克...[阅读全文]