胶体金与蛋白质的结合成功与否，取决于pH值，一般只有在蛋白质等电点(p I )略偏碱的条件下，二者才能牢固地结合，因此，标记之前须将胶体金溶液的pH值调至标记蛋白质的等电点略偏碱。一般可用0．1mol/LK 2 CO 3 或0．1mol/L HCl调高或调低pH值。由于金溶胶会...[阅读全文]

当用纯化抗原进行选择时，评价所选择抗体的最佳方法是在高通量滴定模式下进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。虽然这也许与抗体最终使用无关，但它提供了一个起始的筛选实验方案，能够让续后的分析集中在有希望的抗体上。大多数噬菌粒展示载体的设计容许进行两种EL...[阅读全文]

1．检验目的 检测血清CEA主要是用于空腔脏器如胃肠道、呼吸道、泌尿道的肿瘤诊断，还可作为手术疗效、是否转移和监测复发的指标；另外在某些良性病变中也会轻度升高，如酒精性肝...[阅读全文]

印迹法(blotting)即转移电泳，是20世纪70年代发展起来的一种新方法。Southern于1975年建立了检测特异DNA片段的DNA-RNA杂交法，称作Southern印迹法。1977年Alwine等把此方法应用到RNA的 研究方面，称作Nouthern印迹法。1979年Towbin等则把该方法扩展应用到蛋...[阅读全文]

庚型肝炎病毒(HGV)呈世界性分布，与人类急性和(或)慢性肝炎有关。主要以血液途径传播，如输血及血制品、静脉吸毒、使用污染的注射器、经常接触血源等。HGV为单股正链RNA病毒，基因组全长9 392个核苷酸。基因结构分为：5非编码区、编码区(结构区和非结构区)、...[阅读全文]

基因芯片(gene chip)是目前生物芯片家族中最完善、应用最广泛的芯片，将许多特定的寡聚核苷酸或DNA片段(称为探针)固定在芯片的每个预先设置的区域内，将待测样本标记后同芯片进行杂交，利用碱基互补配对原理进行杂交，通过检测杂交信号并进行计算机分析，从...[阅读全文]

1. IPG的pH值范围 等电聚焦电泳(isoelectrofocusing，IEF)目前广泛使用商品化的IPG胶条。其pH值范围的选择一般遵循以下原则：①pH 3一10线性梯度胶适于了解样本中所有蛋白质的分布情况；②pH 310非线性梯度胶能提高pH 57之间的样本蛋白质解析度；③联合使用p...[阅读全文]

一般认为胶体金粒子表面为一层AuCl2，因此，粒子表面带有负电荷，这种负电荷粒子之间相互排斥，形成稳定悬浮的胶体金溶液。 金颗粒表面可以包被一层生物大分子（如蛋白）来稳定和保护这些粒子，以免受外来电解质的影响而相互凝聚在一起。胶体金粒子对蛋白的...[阅读全文]

一般而言，一个普通的噬菌体展示项目的构成其步骤可以分为三个阶段：构建(或得到)一个(多)肽变异体(variant)的文库；筛选；分析筛选出的克...[阅读全文]

在观察到富集时，筛选过程也就成功了。一个噬菌体群落必须要达到的首要标准就是相对于无插入噬菌体的富集，这也就是为什么我们建议用相对于非重组噬菌体的倍数作为因变量，以图表的形式来描述数据。在相同靶标上的噬菌体比噬菌体的比较告诉我们，重组多肽的...[阅读全文]