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  • [免疫室] 免疫印迹技术的特殊常见问题处理

    一、免疫印迹检测酪氨酸残基的磷酸化 由于针对磷酸化酪氨酸残基的特异性抗体已经制备成功并商品化,因此,可用于检测印迹膜上蛋白质中磷酸化的酪氨酸。当本书即将出版之时, 已有特异针对磷酸化丝氨酸和磷酸化苏氨酸抗体的首次报道(Zymed)。如果这些抗体被证...[阅读全文]

  • [免疫室] 固相膜免疫测定的临床应用

    作为简便快速检验方法,固相膜免疫测定已在临床得到广泛应用,近年来由于制备技术的改进和试剂原料的提高,应用范围更加广阔。现国内外有商品供应及文献报道的有以下检测项目。 (一)激素 应用最广的首推检测尿液人绒毛膜促性腺激素(HCG)的早早孕诊断试剂。妇...[阅读全文]

  • [免疫室] 电化学发光免疫测定方法

    电化学发光免疫测定(electrochemiluminescence immunoassay,ECLl)是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物。ECLI中标记物的发光原理与一般的化学发光(CL)不同,是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,实际上包括了电化学和化学发光2个过程。E...[阅读全文]

  • [免疫室] 寡核苷酸切除和脱保护操作步骤

    寡核苷酸3,OH和琥珀酰连接臂之间的酯键的切除在全自动合成仪上是自动进行的,但也可以按照下列方法手工完成,全部操作都在通风柜内进行。所需材料为:浓氨水溶液,带螺盖的小瓶(5m1),1.0ml气密性注射器,旋转蒸发器或快速真空干燥器。 具体操作步骤如下:...[阅读全文]

  • [免疫室] 免疫荧光细胞化学染色直接法

    免疫荧光细胞化学染色直接方法 1.染色 切片经固定后,滴加适当稀释度的荧光抗体(如兔抗人广球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等),在室温或37C环境下染色30min,将切片置人能保持潮湿的染色盒内,以防止干燥。 2.洗片 倾去存留的荧光抗体,将切片浸...[阅读全文]

  • [免疫室] 杂交瘤细胞的选择与抗体的检测方法

    1.HAT选择杂交瘤细胞 脾细胞和骨髓瘤细胞经PEG处理后形成多种细胞的混合体,只有脾细胞与骨髓细胞形成的杂交瘤细胞才有意义。在HAT选择培养液中培养时,由于骨髓瘤细胞缺乏胸苷激酶或次黄嘌呤鸟嘌呤核糖转移酶,故不能生长繁殖,而杂交瘤细胞含有上述两种酶...[阅读全文]

  • [免疫室] 酶联法检测血吸虫抗体技术方法

    [检测方法] ELISA法 [方法学原理] 将血吸虫可溶性抗原与固相载体联结形成固相抗原,加待检血清,如血清中有特异性抗体则与固相抗原相结合,形成固相抗原抗体复合物;再加HRP标羊抗人IgG抗体,形成固相抗原抗体羊抗人IgG酶标记抗体复合物,在此基础上加酶底物...[阅读全文]

  • [免疫室] 免疫印迹的蛋白质溶液的制备技术

    大多数蛋白质溶液可与样品缓冲液混合并直接用于免疫印迹。下述方法可用于细胞去污剂裂解液,柱层析洗脱液和大多数其他来源的抗原样品。 直接分析蛋白质样品,需满足下列要求:①蛋白质样品必须溶于与凝胶电泳系统相匹配的溶液中。对于Tris/GlycineSDS聚丙烯...[阅读全文]

  • [免疫室] 布氏杆菌病的免疫学方法

    该方法又称变态反应试验,主要检测机体变态反应水平的高低。因为变态反应一般在感染后20~25天出现,因此不宜做早期诊断。本方法主要用于动物的大群检疫。 用游标卡尺测量注射部位皮肤厚度,然后0.1ml布氏杆菌素,在尾褶、肋腹部或颈侧部进行皮内注射,48~...[阅读全文]

  • [免疫室] 细胞免疫染色复染技术方法

    细胞免疫染色复染常有助于在细胞免疫染色中鉴别不同的细胞类型,或者亚细胞结构。这对组织切片来说是基本步骤,并可鉴定细胞的类型。也可用于其他染色反应。复染不能使用荧光染料,因其复染后可产生自发荧光。为了选择一种适宜的复染方法,首先应检测细胞染...[阅读全文]

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