器材和试剂的准备 TAE缓冲液：40 mm01/L Tris-乙酸，1 mm01/L乙二胺四乙酸(EDTA)；调pH至8．0，高压灭菌 TAE/琼脂糖凝胶：TAE缓冲液，1％(w/v)琼脂糖，1：5000(体积比)10％溴化乙锭 2YT培养基：10g细菌用酵母提取物，16g细菌用胰蛋白，5g NaCl；加水到1L并用...[阅读全文]

基于噬菌粒系统来生产高多样性的噬菌体展示文库，下面的方法已被优化。进行一些小的修改后，这些方法也适用于基于噬菌体的展示系统。特别的，噬菌粒需要额外的辅助噬菌体(helperphage)来包装DNA到噬菌体颗粒中，噬菌体载体常常自我包装。 1 单链DNA模板的制...[阅读全文]

[器材和试剂] ● 2YT／tet培养基 ● 超级肉汤(Superbroth)／tet培养基： 24g细菌用酵母提取物，12g细菌用胰 蛋白胨，5m1甘油，加水至900ml，高压灭菌；加100mi经过高压灭菌的0．17mol／LK2HP04 0．72m01／L KH2P04 和5ug／m1的四环素 ● 经过过滤灭菌的用超...[阅读全文]

在印迹膜经过处理可用于抗原检测之前，须再进行封闭以防免疫试剂的非特异性吸附。检测过程是连续进行的。将印迹膜与一定浓度的蛋白质或去污剂溶液孵育可实现封闭。然后通过抗体与在固定膜上的蛋白质结合来定位抗原。抗原可用易识别的示踪剂标记的抗体进行检...[阅读全文]

丽春红S适用于酸性水溶液，染色快但不持久，在后续处理中红色染料易被洗去。由于与蛋白质的结合是可逆性的，该染色法适合用于所有显示抗原的技术。因此，丽春红S可以常规用来验证转印以及定位分子量标记物或其他内参照。然而，该染色法不太灵敏，也很难以图...[阅读全文]

若在同一标本中有A和B两种抗原需要同时显示，A抗原的抗体用FITC标记，B抗原的抗体用TRITC标记，可采用以下染色方法： 原代培养胚胎14天大鼠端脑细胞：在骨发生形态蛋白{诱导下，乙酰胆碱转移酶(呈绿色荧光)和同源域蛋白Islet1(呈红色荧光)共存于细胞质内(激...[阅读全文]

[检测方法] ELISA法 [方法学原理] 将血吸虫可溶性抗原与固相载体联结形成固相抗原，加待检血清，如血清中有特异性抗体则与固相抗原相结合，形成固相抗原抗体复合物；再加HRP标羊抗人IgG抗体，形成固相抗原抗体羊抗人IgG酶标记抗体复合物，在此基础上加酶底物...[阅读全文]

立克次体(Rickettsia)是一类专性活细胞内寄生的原核细胞微生物，具有细胞壁，含有RNA和DNA，以二分裂繁殖。需在细胞内繁殖，不能在无细胞的人工培养基中生长。它是属于人兽共患的自然疫源性疾...[阅读全文]

器材与试剂的准备 洗涤缓冲液 结合缓冲液 辣根过氧化物酶(HRP)连接的抗M13单克隆抗体(mAb) (Amersham Biosciences) HRP底物㈠OPD(邻苯二胺，o-phe-nylenediamine) (Sigma)或ATBS 【2，2-连氮基-双-(3-乙基苯并噻吡咯啉-6-磺 酸)，2，2-azinobis(3-ethylbenzo...[阅读全文]

结合筛选，或后随着扩增的结合筛的循环，应继续进行直到得到了合适的变异体，或者直到已经能推断出得不到这样的克...[阅读全文]