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  • [免疫室] 抗核膜抗体的检测技术方法

    最常用的检测方法是IIF。不同的靶抗原,其相应抗体的荧光图形不同。在以Hep2细胞为基质检测时,板层素抗体和LAPs抗体在核膜处呈连续的环状着染。NPCs抗体呈不连续的斑点状着染。因而NPCs抗体要注意与抗dsDNA和组蛋白抗体的区别,后者分裂期染色质阳性。在冰...[阅读全文]

  • [免疫室] 流式细胞术(FCM)检测T淋巴细胞规程及注意事项

    T淋巴细胞包含有不同的亚群,其中较为重要的有:CD广(总T细胞)、CD广(辅助与诱导T细胞)、CD广(抑制与细胞毒T细胞)。它们在不同情况下产生的调节因子和趋化因子有所不同。 [检测方法] 流式细胞术(FCM) [方法学原理] 利用不同荧光物质标记的抗CD3、CD4、CD8单...[阅读全文]

  • [免疫室] 对盖玻片上生长的细胞进行染色

    检测范围大约为每个细胞表达1 00010 000个抗原分子。 一、特点 快速简便;检测抗原的存在及定位;定性,半定量;灵敏度依赖于抗原量及位置;高浓度抗原,用低亲和力抗体也能检测。 二、操作步骤 (1)在细胞染色前将盖玻片灭菌处理,将圆形盖玻片(广或1.5*)置...[阅读全文]

  • [免疫室] 酶活性分析法检测蛋白质步骤

    表现出的酶GUS可以水解其基质衍生物 p NPG,所产生的黄色生成物 p -nitrophenol,可供活性测定 (Jefferson et al, 1986); 仪器用具:ELISA光计 (Dynatech);微滴定盘 (microtiter plate, Nunc F96 Maxisorb 442404) 药品试剂:基质溶液 (GUS reaction buffe...[阅读全文]

  • [免疫室] ELISA的标本保存主要事项

    可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。...[阅读全文]

  • [免疫室] 抗氨基酰tRNA合成酶的抗体意义

    非Jo1 aS与Jol抗体有着相似的临床意义。当患者具有肌无力,CPK升高及相应的肌电图特征时,aS阳性可排除其他肌肉疾病,为PM或DM诊断提供有力支持。10%的PM/DM患者肌肉活检为阴性表现,此时如排除甲状腺疾病,aS阳性则可做出PM/DM诊断。aS对PM诊断特别有帮...[阅读全文]

  • [免疫室] 核糖体P蛋白的检测技术方法

    常用的检测方法为IIF、ELISA和蛋白质印迹法。IIF法的荧光特征同抗核糖体抗体。胃主细胞强着染,胃壁细胞阴性;肾近曲、远曲小管均匀着染。但是IIF法常常会导致P蛋白抗体漏检,30%~60%的P蛋白抗体能产生典型的抗核糖体抗体的荧光图形。 ELISA、蛋白质和放...[阅读全文]

  • [免疫室] 蛋白质转印法检定蛋白质

    蛋白质经SDS-PAGE后,胶片浸入转印缓冲液,蛋白质可被转印到硝化纤维纸(nitrocellulose) 上,先经素洗去SDS,并使蛋白质回原态抗原性,可使用抗体进免疫染色 (Towbin et al, 1979)。 仪器用具:电泳转印槽 (Hoefer Transphor TE 52):转印槽 (可容纳4 个转印...[阅读全文]

  • [免疫室] 胶体金制备前的准备工作

    制备胶体金的方法很多,提前准备好工作真是 智者无敌 ,其中应用较为广泛的是还原法,而分散法和其他凝聚法都不合乎要求。还原法的基本原理是在氯化金溶液中加入一定量的还原剂,使金离子还原为金原子。在医学研究中最常用的还原剂有白磷、乙醇、过氧化氢、...[阅读全文]

  • [免疫室] 辛酸提取法纯化多克隆抗体

    辛酸提取法纯化多克隆抗体该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液中McAb。 【材料和试剂】 (1)正辛酸。 (2)60mmol/L,pH4.0醋酸缓冲液,PBS。 (3)透析袋。 (4)高速低温离心机。 【操作步骤】 (1)将待提取样品用6...[阅读全文]

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