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巨细胞病毒实验室诊断项目及结果分析

时间:2011-08-04 01:53|来源:实验室前沿| | 分享|点击:


巨细胞病毒感染(cytomegalovirus infection)是由人巨细胞病毒(humancytomegalo virus,HCMV)引起的一种全身性感染综合征,又称巨细胞包涵体病(cytomegalic inelusion disease,CID)。临床上为多脏器受累,症状复杂多样,受感染组织细胞和胞质内有特殊包涵体的巨细胞为其病理学特征。多数为隐性感染,少数可发生视网膜炎、肝炎、肺炎、脑炎、结肠炎、单核细胞增多症、血小板减少性紫癜等多器官病变。CMV感染十分普遍,呈世界性流行,在人群中感染率很高。由于巨细胞病毒可经宫内感染造成死胎、流产、早产,也可导致先天畸形,因而可影响到优生优育和人口质量。该病毒可长期潜伏体内,一旦机体免疫力减退,病毒将会被激活而致病。 织梦好,好织梦

    [病因学]  HCMV属于疱疹病毒科,是人类疱疹病毒组中最大的一种病毒,直径200nm,核心为双股线形DNA,有典型的疱疹病毒结构。HCMV只能在人纤维母细胞培养中增殖,而不能在其他动物细胞中生长,增殖非常缓慢,初次分离需1个多月才能出现细胞致病变作用(CPE);细胞变圆,膨胀,细胞及核巨大化,核周围出现大型嗜酸性包涵体。HCMV在20%乙醚中最多存活2h。pH<5时,或置于56℃环境中30rain,或紫外线照射5min可被充分灭活。HCMV的感染性对冻融或存于-20℃或-50℃环境中均
不稳定,10%的家用漂白粉可使其感染性明显降低。
    [实验室诊断]
    1.特异性检查
    (1)病毒分离。
    (2)巨细胞包涵体检查。
    (3)血清抗体检测:最常用的有补体结合试验(CF)、间接免疫荧光试验(11F)、酶免疫试验(EIA)、间接血凝试验(1HA)和放射免疫试验(RIA)等检测CMV-IgG和IgM抗体。
    (4)DNA探针:已广泛应用于检测HC—MV,其中以32P标记的探针敏感性最高,对某些标本来说,杂交方法可能比病毒分离更敏感。
    (5)聚合酶链式反应(PCR):PCR检测HCMV标本具有很高的敏感性。从HCMV感染的组织培养上清可检测到相当于几十个病毒的DNA分子或1—5PFU/m1病毒的DNA序列。用非放射性寡核苷酸探针进行Southern杂交分析扩增产物,可从尿液标本中检测到lpg HCMVDNA序列的水平。
    2.非特异性检查  外周血常规检查;肝功能检查。
    [结果分析与判断]
    1.病毒分离  病毒分离最好用唾液、尿液、生殖道分泌物、乳汁和白细胞,接种到人的成纤维细胞内繁殖和分离,细胞病变效应(CPE)在1d或数周后出现,经固定和HE染色后可观察到巨细胞,核内有包涵体,核周晕圈及嗜酸性胞浆内包涵体,很像“猫头鹰眼”(owls eye),亦可用单克隆或多克隆抗体的荧光染色等方法检查。
    2.巨细胞包涵体检查  受检的组织细胞见到典型的巨细胞包涵体有助于本病的诊断,但其检出率并不高,且不能仅以此作为确诊的依据。
    3.血清抗体检测  血清抗—CMV IgM可作为早期和现症患者诊惭的依据,是目前最常用的诊断方法。用脐带血检测抗—CMV IgM可以诊断HCMV先天性感染。双份血清检测抗—CMVIgG呈4倍以上升高者有助于诊断。免疫功能低下者可出现假阴性。
    4.PCR检测  PCR技术对HCMV感染的检测具有临床应用价值,因为体液中病毒DNA先于病毒感染的临床症状或血清学证据的出现,可作为HCMV感染的早期指标。由于HCMV可通过胎盘内感染、产道感染等途径传播,而且受感染的新生儿病死率较高,因此利用PCR进行早期诊断并采取及时的治疗措施,对优生优育有重要意义。利用这种方法,还可鉴定器官或组织移植手术中供体是否为HCMV感染。再者,PCR检测指标稳定,还可进行半定量分析,因此可作为评价各种抗病毒药物疗效的手段。
    5.血常规检查  血常规检查白细胞总数增多,以淋巴或单核细胞增多为主,可见异常淋巴细胞;有贫血及血小板减少。累及肝脏导致HCMV肝炎的患者,可出现肝功能异常。
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责任编辑:何辉

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