口蹄疫血清学诊断方法在FMD的监测方面十分有效，包括补体结合试验、中和试验、凝集试验、免疫扩散试验、沉淀试验、免疫电泳、免疫荧光和放射免疫等技术。目前被广泛应用的有琼脂扩散试验、补体结合试验、中和试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验。
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(1)琼脂扩散试验 该方法既可以检测病毒抗原，也可以检测抗体。在琼脂中FMDV抗原和标准阳性血清或未知的被检血清之间形成免疫沉淀线，并能在48h之内提供结果。长期以来，该试验主要用于血清样品中FMDV的检测。
(2)补体结合试验(CFT) 1952年Brooksby建立了补体结合试验(CFT)。近年来，CFT常用于FMD病料的检测和分型。补体结合试验是应用可溶性抗原与相应的抗体结合后，其抗原—抗体复合物可以结合补体，如再加入致敏红细胞(溶血素)，即可根据是否出现溶血反应判定反应系统中是否存在相应的抗原和抗体。补体不能和单独的抗原或抗体结合，若待检材料中的FMD抗原(或抗体)不对应或没有相应的抗原(或抗体)不能形成抗原—抗体复合物，补体只能和绵羊红细胞与溶血素构成的溶血系统结合，引起红细胞溶解，CFT结果为阴性；若待检材料中的FMD抗原(或抗体)与某型抗体(或抗原)特异性结合，则反应混合液中的补体就不参与溶血反应，红细胞不再被溶解，CFT结果阳性。CFT既可鉴定抗原，又可鉴定抗体，并可定量。但CFT方法相对不够敏感，且有易解释样品的亲补体活性和抗补体活性。
(3)病毒中和试验(VNT) 病毒中和试验是利用血清中和抗体与病毒特异性的结合作用，使病毒失去吸附细胞的能力或抑制其侵入和脱衣壳，丧失对易感动物和敏感细胞的感染力。VNT既可鉴定抗原，又可对抗体定量测定，具有型特异性，是经典的FMD检测方法，常作为其他方法的参照。该方法用于FMD感染急性期和恢复期的血清(发病后2～3周)检测，可根据病毒—血清混合物的动物发病死亡数或产生CPE的细胞孔数来判定血清中所含抗体量和血清亚型。Rweyemamu等建立的VNT，多年以来一直被作为血清学监测的传统方法。VNT虽然具有型特异性但它需要细胞培养，需要2～3天才能够获得结果。被检血清低效价导致的假阳性有时出现，动物精神沉郁或偶然发病、发烧也会干扰VNT结果。VNT又需要单层培养细胞，因此细胞生长状态，病毒的细胞嗜性，细胞的污染，以及血清样品因素均对VNT的推广和应用带来诸多限制性因素。
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