粗提细菌AmpC酶方法：
(1)-70度胰化大豆肉汤增菌液冻融法
挑取过夜培养物制备含1.5亿CFU/ml菌悬液，取50微升加到12ml胰化大豆肉汤培养基中，振荡培养4小时。取1ml放入无菌Eppendoff管中4000r/min离心30分钟，吸去上清液，将沉淀放-70℃，30分钟，37℃水浴3分钟，反复冻融5-6次。用pH7.0，0.01M PBS复溶沉淀物，4℃12000r/min，离心1小时，吸取上清液，即为酶粗提取物。将其接种血平板上过夜培养，应无菌生长。
(2)直接配制菌悬液冻融法
从过夜培养的血平板上挑取菌落，用pH7.0，0.01M PBS配制成6亿CFU/ml的菌悬液，从中取1ml，4000r/min离心30分钟，将细菌沉淀放-70℃，30分钟，37℃水浴3分钟，反复冻融5-6次，其它操作与-70℃冻融法相同。
AmpC酶粗提取方法中，关键在于掌握好冻融时间、次数和低温离心速度。菌悬液浓度大，冷冻时间应延长，否则活菌过多，不能用检测AmpC酶，此时可采用过滤除菌法除菌。溶解温度应稳定在37℃，速融后应立即速冻。
-70度胰化大豆肉汤增菌液冻融法与直接配制菌悬液冻融法结果一样。
![嗜中性粒细胞来袭时的微细胞之战[图]](/uploads/allimg/090616/02113V132-0_lit.jpg)
