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β2微球蛋白(β2-MG)的测定方法

时间:2011-08-16 00:25|来源:实验室前沿| 分享|点击:


β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2—MG)是正常人血清中定量存在的小分子蛋白,凡携带HLA的细胞均存在β2MG,淋巴细胞、巨噬细胞和内皮细胞因富有HLA,β2-MG含量相应较高。p2—MG几乎均在肾脏进行分解代谢,正常情况下,β2MG可自由通过肾小球,从肾小球滤过的p2-MG 99.9%以上被近曲肾小管重吸收和分解。当肾脏近曲小管轻度受损时,P2—MG排泄量即明显增加。p2-MG的测定有RIA、EIA等方法,现建立时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)来检测p2-MG,此法具有敏感性高,特异性强,检测速度快,可测范围宽,且克服了BIA技术中核素需辐射防护,半衰期短等缺点。但目前常用的仍是RIg.法,故介绍如下。 copyright sysqy.com

 
    RIA法检测β2MG  已有测定试剂盒供应,采用分离方法,测定范围宽,血清和尿液样品都无需稀释,并可在同一标准曲线上进行测定。
 
    1.试剂  ①β2MG标准品:0、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0mg/L,共7瓶,按说明书加蒸馏水溶解。零标准为液体(4mi.);②“I-β2—MG;③抗β2-MG抗体,按说明书加蒸馏水进行溶解;④分离试剂:使用前需充分摇匀。
 
    2.结果处理  以β2-MG标准晶的log值为横坐标,以B/Bo%为纵坐标绘制标准曲线,或采用log-logit直线回归等方法作图。样品值可根据其B/Bo%在标准曲线上查得,或通过计算求出样品中P2—MG的含量。由于尿液样品为200/xL,是血清标本(50btL)体积的4倍,故由曲线查得的尿样结果应除以4,方是尿样中β2MG的实际含量。
 
    3.注意事项  血清或血浆标本在4~C可保存2-4周;—20℃可保存半年。但尿液中β2MG的稳定性受pH值的影响,酸性尿特别是pH5.2以下极易分解,因而取得随意尿标本后,需用lmol/LNaOH调至pH7.0~7.5,—20~C可保存4周。测定前要离心沉淀,以避免受沉淀物干扰。
 
    4.正常参考值  血清:1.615±0.335m9/L;尿:0.091±0.068mg/L。但由于方法不同,
所测得结果有很大差异,故各实验室应根据所用试剂盒,测出各自正常值范围。
 
    5.临床意义  在实质性肿瘤中,原发性肝癌、肺癌、胃癌、大肠癌等均见血清β2-MG测定值升高,其中原发性肝癌患者的阳性率最高。在造血系统恶性肿瘤中,几乎所有的慢性淋巴细胞白血病患者均见血清p2·MG呈高值,且其值与肿瘤的范围和进展呈显著相关。当肾小球滤过率下降而血清肌酐正常者,一部分患者血清β2-MG即上升,故作为肾小球滤过率的指标有临床实用价值。如急、慢性肾小球肾炎、尿毒症等明显升高;糖尿病肾病患者β2-MG均异常;肾移植成功后血β2-MG很快下降,如血β2-MG突然再次上升,说明有排斥反应。自身免疫性疾患,如SLE、干燥综合症、桥本甲状腺炎、自身免疫性溶血性贫血患者血清β2MG呈高值。血β2MG测定,还可作为肝脏疾患活动度的检测指标。AIDS病患者血清β2MG可增高。恶性胸、腹水的β2MG与血清β2MG之比值大于1.3。
 
    尿中β2MG增加的机制有两种:①肾小管机能障碍。主要见于先天性代谢异常如范可尼综合征、胱氨酸尿症、半乳糖血症、Wilson病等;重金属中毒(如镉中毒所致肾小管损害时,尿p2·MG可达正常值的100—1 000倍),以及继发性肾损害(如流行性出血热等疾患)及药物性肾损害。当肾小管净重吸收率只要减少1%,尿β2-MG排出量就要增加30倍,故尿p2-MG测定是诊断肾小管损害非常灵敏的试验;②血清β2MG明显上升时。主要见于肾小球机能障碍,肾功能不全;自身免疫性疾患;恶性肿瘤;肝脏疾患以及器官移植后的排斥反应时。
Tags:方法,测定,蛋白,2MG,血清,
责任编辑:何辉

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