实时荧光 RT-PCR 方法检测新型冠状病毒核酸 本文来自实验室前沿
（一）目的。 copyright sysqy.com
规范实时荧光RT-PCR方法检测新型冠状病毒核酸的工作程序，保证实验结果的正确可靠。 sysqy.com
（二）范围。
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适用于实时荧光RT-PCR方法检测新型冠状病毒核酸。
（三）职责。
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检测人员：负责按照本检测细则对被检样本进行检测。 sysqy.com
复核人员：负责对检测操作是否规范以及检测结果是否准确进行复核。
部门负责人：负责对科室综合管理和检测报告的审核。
（四）样本接收和准备。 本文来自实验室前沿
核对被检样本姓名、性别、年龄、编号及检测项目等； 内容来自实验室前沿网站
待检样本的状态如有异常，需注明； 内容来自实验室前沿网站
待检样本应存放于-70℃冰箱保存。
（五）检测项目。
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1.新型冠状病毒核酸测定（实时荧光RT-PCR方法） 推荐选用针对新型冠状病毒的ORF1ab、N基因区域的引物和探针。
靶标一（ORF1ab）:
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正向引物（F）： sysqy.com
CCCTGTGGGTTTTACACTTAA 反向引物（R）：
ACGATTGTGCATCAGCTGA 内容来自实验室前沿网站
荧光探针（P）：
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5'-FAM-CCGTCTGCGGTATGTGGAAAGGTTATGG-BHQ1-3' 内容来自实验室前沿网站
靶标二（N）: 本文来自实验室前沿
正向引物（F）： copyright sysqy.com
GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT 反向引物（R）： sysqy.com
CAGACATTTTGCTCTCAAGCTG
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荧光探针（P）： copyright sysqy.com
5'-FAM-TTGCTGCTGCTTGACAGATT-TAMRA-3'
核酸提取和实时荧光RT-PCR反应体系及反应条件参考相关厂家试剂盒说明。
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2.结果判断 阴性:无Ct值或Ct≥40。 sysqy.com
阳性：Ct值<37，可报告为阳性。
灰度区：Ct值在37-40之间，建议重复实验，若重做结果Ct 内容来自实验室前沿网站
值<40，扩增曲线有明显起峰，该样本判断为阳性,否则为阴性。 sysqy.com
注：如果用的是商品化试剂盒，则以厂家提供的说明书为准。
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