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实时荧光RT-PCR方法检测新型冠状病毒核酸作业指导书

时间:2020-05-15 16:51|来源:卫健委| 分享|点击:


实时荧光 RT-PCR 方法检测新型冠状病毒核酸 copyright sysqy.com

(一)目的。

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规范实时荧光RT-PCR方法检测新型冠状病毒核酸的工作程序,保证实验结果的正确可靠。 内容来自实验室前沿网站

(二)范围。 copyright sysqy.com

适用于实时荧光RT-PCR方法检测新型冠状病毒核酸。

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(三)职责。 内容来自实验室前沿网站

检测人员:负责按照本检测细则对被检样本进行检测。 sysqy.com

复核人员:负责对检测操作是否规范以及检测结果是否准确进行复核。

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部门负责人:负责对科室综合管理和检测报告的审核。 内容来自实验室前沿网站

(四)样本接收和准备。

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核对被检样本姓名、性别、年龄、编号及检测项目等; sysqy.com

待检样本的状态如有异常,需注明;

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待检样本应存放于-70℃冰箱保存。

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(五)检测项目。 实验室前沿,了解实验室动态

1.新型冠状病毒核酸测定(实时荧光RT-PCR方法) 推荐选用针对新型冠状病毒的ORF1ab、N基因区域的引物和探针。

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靶标一(ORF1ab): copyright sysqy.com

正向引物(F): 实验室前沿,了解实验室动态

CCCTGTGGGTTTTACACTTAA 反向引物(R): sysqy.com

ACGATTGTGCATCAGCTGA copyright sysqy.com

荧光探针(P):

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5'-FAM-CCGTCTGCGGTATGTGGAAAGGTTATGG-BHQ1-3'

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靶标二(N): copyright sysqy.com

正向引物(F):

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GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT 反向引物(R): 内容来自实验室前沿网站

CAGACATTTTGCTCTCAAGCTG

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荧光探针(P): copyright sysqy.com

5'-FAM-TTGCTGCTGCTTGACAGATT-TAMRA-3'

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核酸提取和实时荧光RT-PCR反应体系及反应条件参考相关厂家试剂盒说明。

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2.结果判断 阴性:无Ct值或Ct≥40。

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阳性:Ct值<37,可报告为阳性。 本文来自实验室前沿

灰度区:Ct值在37-40之间,建议重复实验,若重做结果Ct 内容来自实验室前沿网站

值<40,扩增曲线有明显起峰,该样本判断为阳性,否则为阴性。 内容来自实验室前沿网站

注:如果用的是商品化试剂盒,则以厂家提供的说明书为准。

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Tags:实时,荧光,RT-PCR,方法,检测,新型,冠状,病毒,核酸
责任编辑:小谷

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