对哺乳类组织的免疫染色研究常采用冷冻切片。就保持组织结构和抗原而言，冷冻切片是制备标本最好的方法。它的主要缺点是标本必需冷冻保存，并需要特殊的切片机如恒冷箱切片机。而许多临床标本用这种方法的效果不好，对组织结构和病理学分析主要采用福尔马林...[阅读全文]

细胞病理涂片的制备技术方法 （1）推片法：用于稀薄的标本，如血液，胸、腹水等。取离心后标本一小滴滴在玻片偏右侧端，用推片用30度夹角将玻片上检液轻轻向左推。 （2）涂抹法：适用于稍稠的检液，如鼻咽部标本。用竹棉签在玻片上涂布，由玻片中心经顺时针...[阅读全文]

在福尔马林固定的组织或细胞上进行操作免疫组化检测NiV特异性抗原是一种安全的NiV实验室检测技术。 很多组织都可以用来进行免疫组化来检测NiV的抗原。用纯化的NiV免疫兔而制备的兔抗血清和一些单克隆抗体进行免疫组化检测NiV特异性抗原。酶标第二抗体选用碱...[阅读全文]

如同体内浆细胞一样，杂交瘤细胞将抗体分泌入组织培养上清液中，收集这些上清液，就可以应用到大多数标准的免疫实验中。 1．杂交瘤组织培养上清液应通过加入1／20的lmol／L Tris(pH 8．0)调节其缓冲度； 杂交瘤组织培养上清液 413下1000g离心5minl去除杂交瘤...[阅读全文]

(1)蛋白酶消化蛋白酶消化可以去除覆盖于抗原决定簇表面的杂蛋白，更为重要的是因甲醛固定而引起的交联被打开，有利于抗原抗体的结合，提高阳性检测率。 (2)抗原修复选择适宜的修复液(pH值、离子浓度)、修复方式、温度。 (3)抗原修复与酶消化结合使用。 (4)高...[阅读全文]

1．酶标直接法和间接法 Nakane(1966)将辣根过氧化物酶(HRP) 标记在抗体免疫球蛋白分子上，创建了酶标记免疫组化的直接法、间接法和桥法。 2．PAP法 Stemberger(1969)在酶桥法的基础上，建立了非标记抗体法，先将HRP免疫兔、羊或鼠，制成抗HRP抗体，再与HRP结...[阅读全文]

基本原理 Sano等(1992)率先利用基因工程的方法表达了A蛋白与链霉亲和素的嵌合体分子获得成功，建立了免疫PCR技术。这是一种新的抗原检测系统，利用细胞工程和基因工程技术，巧妙地将抗原抗体反应的特异性同PCR的敏感性相结合，通过构建单克隆抗体与重组核酸...[阅读全文]

病理常规组织培养方法 1）初代消化培养法 1. 准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2. 布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。 3. 处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；...[阅读全文]

Fas（CD95/APO-1）分子已被证实是一种细胞表面的受体，可与Fas配体（FasL）结合，介导细胞凋亡。本法利用抗－Fas－生物素通过蛋白印迹法、流式细胞分析或免疫组化染色检测Fas/Apo-1分子。 【样本来源】 (1) 单层粘附细胞； (2) 细胞悬液； (3) 组织切片细胞...[阅读全文]

Bcl-2原癌基因被认为是哺乳动物细胞凋亡过程中的负调控剂。本法采用鼠抗Bcl-2单克隆抗体，可通过免疫组化或免疫细胞化学的方法用于检测组织或细胞中的Bcl-2，或者通过Western blots检测细胞粗提物。 【样本来源】 （1） 离心细胞； （2） 细胞涂片、冰冻或石...[阅读全文]