随着研究的进展,仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞表达特定细胞因子的手段包括: ELIspot 、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析(...[阅读全文]
PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究...[阅读全文]
免疫纳米金染色与免疫胶体金银法染色基本相似,也可分为包埋前染色和包埋后染色。下面分别介绍包埋前免疫纳米金单重染色和与免疫酶染色结合的双重染色基本程序: 包埋前免疫纳米金单重染色按以下步骤进行免疫染色: 1)含1%正常血清或l%BSA的PBS预孵育20~3...[阅读全文]
1.杂交瘤细胞的冻存 及时冻存原始孔的杂交瘤细胞每次克隆化得到的亚克隆细胞是十分重要的。因为在没有建立一个稳定分泌抗体的细胞系时,细胞培养过程中随时可能发生细胞的污染、分泌抗体能力的丧失等等。如果没有原始细胞.的冻存,则可因上述意外而前功尽...[阅读全文]
将微孔表面包被纯化的肺炎支原体抗原,将被稀释过的患者血清加入微孔中,如存在支原体抗体可与微孔上抗原相结合,然后洗去未结合物质,再加入酶标记抗人IgM与抗原抗体复合物结合,洗去未结合的酶标记抗体,最后加入显色液。在特定时间终止显色反应,通过酶标...[阅读全文]
在组织或器官的免疫染色中遇到上述问题是很严重的。因此,选择最好的抗体用于组织染色极为重要。有些抗体在免疫斑点、免疫共沉淀甚至在培养细胞的染色中可获得满意的效果,但在组织免疫染色中可能是失败的。在免疫染色中遇到这些问题,主要是由于需在原位观...[阅读全文]
器材和试剂的准备 TAE缓冲液:40 mm01/L Tris-乙酸,1 mm01/L乙二胺四乙酸(EDTA);调pH至8.0,高压灭菌 TAE/琼脂糖凝胶:TAE缓冲液,1%(w/v)琼脂糖,1:5000(体积比)10%溴化乙锭 2YT培养基:10g细菌用酵母提取物,16g细菌用胰蛋白,5g NaCl;加水到1L并用...[阅读全文]
基于噬菌粒系统来生产高多样性的噬菌体展示文库,下面的方法已被优化。进行一些小的修改后,这些方法也适用于基于噬菌体的展示系统。特别的,噬菌粒需要额外的辅助噬菌体(helperphage)来包装DNA到噬菌体颗粒中,噬菌体载体常常自我包装。 1 单链DNA模板的制...[阅读全文]
一、细菌学诊断: 嗜血杆菌属革阴性杆菌,培养条件显示多形性特点,易染性,此菌无芽孢,无运动。 1.镜检:从软下疳开放性溃疡取材涂片标本染色,杜克雷嗜血菌易检出,未破溃病灶从脓肿或横痃中穿刺,取其穿刺液涂片标本染色也易检出,更为典型,用美蓝染色...[阅读全文]
病理及尸体解剖检查申请单、报告单书写及规范要求 1.病理检查申请单由经治医师按规定逐项填写,医师签全名或盖印章。字迹务必清楚,字迹潦草难以辨认或填写过于简单者,应退回给申请医师补充填写或重新填写。 2.申请单应简明书写病史摘要、手术所见、临床...[阅读全文]
免疫电镜技术与光镜免疫细胞化学染色方法的基本原理和试剂准备基本相同,相关内容可参...
配1000ML的0.1 %盐酸乙醇液:蒸馏水 290ml 与无水 乙醇 700 ml 混合后加入浓盐酸 10m...
1.组织处理 恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因...
Kausche等(1939)烟草花叶病毒吸附到金颗粒上,在电镜下观察金离子呈高电子密度。然而...
辛酸提取法该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液...
常规固定液的配制 (1) 10%甲醛液(常规标本用此固定液固定标本) 浓甲醛 10ml 蒸馏...