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  • [PCR室] 基因芯片实验操作流程

    1.样本DNA或RNA制备 芯片实验中核酸的抽提没有特殊之处,参照常规的分子生物学实验手册就可以。但对于RNA样本,由于RNA的稳定性很差,在活体内的半衰期也很短,因此取材一定要新鲜,取材后迅速保存在液氮中,在整个处理过程中要非常小心,以免降解,影响实...[阅读全文]

  • [免疫室] AP融合蛋白的测定方法

    A.酶裂解测定法 1.在离心管中加入恒定浓度(15ug)的AP融合蛋白以及相应的能够结合此融合蛋白的抗亲和性结构域标签树脂。室温反应2小时,温和摇动。 2.5000g离心1分钟,弃去上清。用1mlTE重悬并再次离心。以TE和蛋白酶反应缓冲液分别洗涤树脂一次。 3.以20...[阅读全文]

  • [临检室] 纤维蛋白原测定(FIB)操作规程SOP

    一、项目名称: 纤维蛋白原凝结时间测定(Fibrinogencoagulativetime,FIB ) 二、检验方法名称: 凝结法 三、方法学原理: 在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后,加入试剂。加入试剂后,采用波长为660nm 的光照射样本。凝血过程(纤维蛋白原转化为纤维蛋...[阅读全文]

  • [免疫室] 光镜免疫金组织化学染色方法

    一、原理 本法是由Geoghegan等(1978)首次应用金标探针检测B淋巴细胞表面抗原,将胶体金颗粒(大于20nm)标记在第二抗体或SPA分子上,制备成金标二抗。其原理是当特异性抗体与抗原结合后,用金标二抗或金标SPA与特异性抗体结合,形成抗原抗体金标抗体复合物,此...[阅读全文]

  • [免疫室] 免疫共沉淀实验技术方法

    免疫共沉淀(co-immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间...[阅读全文]

  • [生化室] 腺苷脱氨酶测定完整操作规程示例

    【方法与原理】 试剂中的腺苷受样本中腺苷脱氨酶( ADA)催化水解生成次黄苷和氨,前者在PNP等物质作用下生成次黄嘌呤,次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶作用下生成尿酸和H 2 O 2 ,H 2 O 2 与4-AA、TBHBA在过氧化物酶作用下生成醌亚氨化合物,通过测定546nm波长处吸...[阅读全文]

  • [免疫室] 抗原纤维蛋白抗体的检测方法

    最常用的检测方法是以培养的Hep2细胞为抗原基质的IIF法。AFA荧光图形为间期细胞核仁清晰的块状着染(2~6个),在分裂中后期细胞染色质呈边缘清晰的致密着染,借此可与其他核仁型抗体区别。 以纯化的核、核仁为抗原基质的蛋白质印迹(免疫印迹)、免疫沉淀法也是...[阅读全文]

  • [免疫室] 抗原纤维蛋白抗体的检测技术

    最常用的检测方法是以培养的Hep2细胞为抗原基质的IIF法。AFA荧光图形为间期细胞核仁清晰的块状着染(2~6个),在分裂中后期细胞染色质呈边缘清晰的致密着染,借此可与其他核仁型抗体区别。 以纯化的核、核仁为抗原基质的蛋白质印迹(免疫印迹)、免疫沉淀法也是...[阅读全文]

  • [免疫室] 免疫印迹技术的特殊常见问题处理

    一、免疫印迹检测酪氨酸残基的磷酸化 由于针对磷酸化酪氨酸残基的特异性抗体已经制备成功并商品化,因此,可用于检测印迹膜上蛋白质中磷酸化的酪氨酸。当本书即将出版之时, 已有特异针对磷酸化丝氨酸和磷酸化苏氨酸抗体的首次报道(Zymed)。如果这些抗体被证...[阅读全文]

  • [免疫室] 固相膜免疫测定的临床应用

    作为简便快速检验方法,固相膜免疫测定已在临床得到广泛应用,近年来由于制备技术的改进和试剂原料的提高,应用范围更加广阔。现国内外有商品供应及文献报道的有以下检测项目。 (一)激素 应用最广的首推检测尿液人绒毛膜促性腺激素(HCG)的早早孕诊断试剂。妇...[阅读全文]

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