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  • [免疫室] 聚丙烯酰胺凝胶薄片的放射活性测定

    聚丙烯酰胺凝胶薄片 35 S、 14 C或 3 H的放射活性测定 1.用自显影X线胶片作模板,切下含放射性目的蛋白的凝胶片段,已经干燥但尚未固定的凝胶很容易操作。 2.将凝胶薄片放入放射性计数小瓶中。 3.用最小量的水(20u1/1X 5mm薄片)膨胀凝胶薄片(室温30min)...[阅读全文]

  • [免疫室] 凝胶铜染法

    凝胶铜染法是传统的考马斯亮蓝或银染法的替代染色方法。将凝胶在氯化铜(CuCl2)溶液中温育,在Tris和SDS同时存在时可形成明显的白色不透明沉淀物。蛋白条带仍然清晰,留下一个多肽分离模式的负染图像。蛋白未结合在凝胶上,可通过EDTA螯合剂去除Cu离子而得以...[阅读全文]

  • [免疫室] 凝胶固定法与干燥法

    凝胶固定法 在很多实验中,电泳分离的蛋白质需要将其沉淀或结合在凝胶内,这类技术统称为固定。各种浓度和厚度的凝胶都可用酸或醇类固定。通常是在室温下将凝胶浸入12.5%三氯乙酸或脱色剂(70%乙酸和25%的甲醇)内。如果用溴酚蓝作为示踪剂,它亦可作为pH...[阅读全文]

  • [PCR室] 病原体检测的PCR技术应用

    1.应用于病毒感染的诊断 目前PCR技术已开始用于甲、乙、丙、戊型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒、巨细胞病毒、乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒、风疹病毒、狂犬病毒、EB病毒以及柯萨奇病毒等所引起人类感染病的诊断。如乙型肝炎病毒(HBV)感染,通常采用的反向血凝法...[阅读全文]

  • [免疫室] 吸附法分离与纯化蛋白质

    在蛋白质的提纯方法中,选择性吸附也是应用历史较久迄今仍在广泛采用的方法之一。早期工作常用高岭土(我国的一种土质,其分子式大致是AL2O32SiO22H2O)、氧化铝(AL2O3)及活性炭等吸附剂,由于这些吸附剂吸附力较弱,或者易引起蛋白质变性而应用不广,现已...[阅读全文]

  • [病毒与微生物室] 梅毒实验室检测血清

    血清的检查主要有两种,一种是非梅毒抗体的检查法则所谓性病研究实验室检验法(简称为VDRL);另一种是针对梅毒螺旋体的特定抗体来检查,称之为螺旋体试验(简称TPHA)和萤光抗体吸附试验法(FTA─ABS)以上三种方法(VDRL ,TPHA ,FTA─ABS)对各期梅毒的敏感度都不...[阅读全文]

  • [PCR室] AFLP技术原理

    AFLP技术是一项新的分子标记技术,是基于PCR技术扩增基因组DNA限制性片段,基因组DNA先用限制性内切酶切割,然后将双链接头连接到DNA片段的末端,接头序列和相邻的限制性位点序列,作为引物结合位点。限制性片段用二种酶切割产生,一种是罕见切割酶,一种是...[阅读全文]

  • [PCR室] 分子生物学基本的常用技术

    DNA重组技术(或基因工程)是20世纪生物学的伟大成就,并已渗透到生命科学包括医学 各个领域,为肿瘤的实验研究和临床诊断及治疗提供了崭新的技术和有用的工具。本附录扼要介绍在分子肿瘤学领域中常用的分子生物学基本技术及其在肿瘤研究中的应用,着重介绍...[阅读全文]

  • [免疫室] 用氯化铯离心法纯化噬菌体

    需要的器材和试剂 L8M Beckman超速离心机或与其相当的机型 吊桶式SWTi4l转头或相当类型 氯化铯(Sigma) PBS 纯化的噬菌体样本 使用方法 1.在每毫升最后的噬菌体悬液(例如来自实验方案13.11)中,加入0.45 g氯化铯,充分混匀至溶解。 2.用吊桶式转头 (或与...[阅读全文]

  • [临检室] 中性粒细胞碱性磷酸酶染色SOP操作规程

    1. 实验原理 在PH9.2-9.8的缓冲溶液中,细胞中的碱性磷酸酶能将底物磷酸苯酚钠水解,生成 -苯酚和磷酸钠,再以稳定的重氮盐与酚偶联成不溶性有色偶氮染料沉淀于胞浆中。 2. 标本采集 2.1 病人准备:了解病人是否对局麻药有过敏史,凝血因子严重缺陷引起的出...[阅读全文]

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