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  • [PCR室] 基因芯片实验操作流程

    1.样本DNA或RNA制备 芯片实验中核酸的抽提没有特殊之处,参照常规的分子生物学实验手册就可以。但对于RNA样本,由于RNA的稳定性很差,在活体内的半衰期也很短,因此取材一定要新鲜,取材后迅速保存在液氮中,在整个处理过程中要非常小心,以免降解,影响实...[阅读全文]

  • [PCR室] PCR检验标本接收程序SOP文件

    一、 目的 保证实验室工作的正常运行,以及时准确的获得实验结果。 二、 适用范围 从事分子生物实验室工作的检验专业人员。 三、 职责 分子生物检验室派出专门人员负责标本的接收。 四、 工作程序 1. 分子生物检验人员接收标本是首先应注意核对检验单:科别...[阅读全文]

  • [PCR室] 大肠杆菌的DNA基因探针技术基因芯片检测技术

    主要有EHEC毒性质粒、VTl、VT2、EAE基因探针。Hudk等使用EHEC 0157:H7质粒的限制性片段VPMl探针进行研究,发现所有的产毒性大肠杆菌和非大肠杆菌均为阴性,50株产Vero毒素的非0157仅5株出现阳性反应,而提高反应温度至45℃,5例假阳性可转变为2例阳性、3例...[阅读全文]

  • [PCR室] 原位免疫PCR的IHC增敏技术方法

    (一)基本原理 Sano等(1992)率先利用基因工程的方法表达了A蛋白与链霉亲和素的嵌合体分子获得成功,建立了免疫PCR技术。这是一种新的抗原检测系统,利用细胞工程和基因工程技术,巧妙地将抗原抗体反应的特异性同PCR的敏感性相结合,通过构建单克隆抗体与重组...[阅读全文]

  • [PCR室] PCR法检测猪链球菌病技术方法

    PCR 法检测猪链球菌病 (1)PCR法 Smith等针对猪链球菌主要致病菌株利用荚膜生物合成基因的DNA序列特性建立了血清型特异性PCR鉴定方法。他们设计了3对引物: CPS2J primers 5-CAAACGCAA GGAA TTACGGTA TC-3, CPS1I primers 5-GA GTA TCTAAA GAA TGCCTA TTG-3...[阅读全文]

  • [PCR室] 抗甲状腺球蛋白抗体检测方法

    过去用于检测Tg自身抗体的方法有:沉淀试验、间接免疫荧光(11F)、血凝试验、ELISA和放射定量分析。目前常用IIF法和ELISA法。IIF法荧光图形为在甲状腺滤泡腔内出现波浪状着染。 在甲状腺炎患者中抗TPO抗体检测方法的灵敏度稍逊于抗Tg抗体,但实际上两者的检出...[阅读全文]

  • [PCR室] 疯牛病发光免疫检测方法

    Prionics-CheckLIA(1uminescence immunoassay)是Prionics AG公司在Prionics-CheckWestern的基础上开发出来的一种新的疯牛病诊断方法,即发光免疫试验。该方法是世界上第二代BSE诊断技术中的最快速的检测方法,也是第一个完全适合于自动化的方法,1999年通过...[阅读全文]

  • [PCR室] 副溶血性弧菌PCR检测技术

    近年来,随着微生物基因组学的发展,微生物基因检测迎来了新的机遇。2000年,Makino等已经完成V.p的基因组测序,V.p毒力基因及特异的基因序列得到进一步确定。根据V.p特异基因序列,设计引物,进行PCR检测,是现阶段检测V,p的最快速准确的方法。目前应用...[阅读全文]

  • [PCR室] 大肠杆菌的PCR技术

    大肠杆菌的PCR技术 中美学者合作,对3.3kb的DNA探针进行了序列分析,发现其编码EHEC溶血素AB基因,此基因与已发表的泌尿道大肠杆菌等的溶血素在DNA序列和氨基酸序列有所不同,是EHEC特有的,并以此为基础,发展了PCR检测方法。此法特异、敏感、快速,可在34...[阅读全文]

  • [PCR室] 甲基化荧光PCR检测

    甲基化荧光检测(methylight)是利用荧光定量性PCR检测亚硫酸氢钠处理后的序列改变。在TaqManR技术中,可以使用3种不同的单核苷酸(正义引物、反义引物和荧光杂交探针),进行不同序列的检测。与已存在的技术相比,甲基化荧光检测最明显的优点就是能同时对几百甚...[阅读全文]

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