甲基化荧光检测(methylight)是利用荧光定量性PCR检测亚硫酸氢钠处理后的序列改变。在TaqManR技术中，可以使用3种不同的单核苷酸(正义引物、反义引物和荧光杂交探针)，进行不同序列的检测。与已存在的技术相比，甲基化荧光检测最明显的优点就是能同时对几百甚...[阅读全文]

一、实验原理 真核生物的一切有核细胞（包括培养细胞）都能用来制备基因组 DNA.真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内，因此，制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离，又要保持DNA分子的完整。提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在...[阅读全文]

1 目的： 保证每批用于临床实验的试剂的质量良好，符合要求。 2 适用范围 ： 各种用于临床实验的核酸扩增荧光检测试剂（HBV、HCV、TB、CT）。 3 操作人 ：孔子 4 质检步骤 4.1 收到试剂后，目测试剂是否处在冻存状态。 4.2 核对试剂品种和数量并检查包装：外...[阅读全文]

淋病是由淋病双球菌亦称淋病奈瑟菌所引起的急性或慢性泌尿生殖器系统的化脓性感染。主要通过性接触传染，女性也可由淋球菌污染的衣裤、浴巾、马桶等感染而发生淋菌性阴道炎。常见检测方法为PCR杂交梳法检测淋球菌DNA。 [测定方法] PCR杂交梳法 [方法学原理]...[阅读全文]

* 全程佩戴一次性手套。皮肤经常带有 细菌 和霉菌，可能污染 RNA 的抽提并成为 RNA 酶的来源。培养良好的微 生物 实验操作习惯预防 微生物 污染。 * 使用灭菌的，一次性的塑料器皿和自动吸管抽提 RNA ，避免使用公共仪器所导致的 RNA 酶交叉污染。例如，使用...[阅读全文]

实时定量PCR体系的优化 1.基本参数的优化： 1）MgCl2的浓度：在PCR反应中，MgCl2的浓度对酶的活性是至关重要的，不仅如此，合适的MgCl2的浓度还能在反应中得到较低的Cp(crossingpoint)值（指PCR达到指数扩增期时，产生一定的荧光高于背景并为仪器所识别时的...[阅读全文]

各种不同样品DNA提取的技巧: (1)福尔马林浸泡标本的DNA提取 1. 福尔马林对DNA有一定的破坏作用，因此提取的工作很有难度。如果有条件最好使用试剂盒，另外组织尽量不要取边缘的，用PBS洗上几次，延长蛋白酶消化时间。提出的DNA先用分光光度计测一下含量，要...[阅读全文]

金黄色葡萄球菌(以下简称金葡菌)在食品污染病例中占据十分重要的位置，同时也是医院临床感染导致肺炎及伤口感染的主要病原菌，占医院感染病例的l0％；而抗生素的广泛应用导致了耐药菌株尤其是耐甲氧西林葡萄球菌的大量出现，使其成为与艾滋...[阅读全文]

PCR是极为重要的DNA增殖技术，应用层面非常广，其中包括核酸探针的制备。如果一段DNA已经被次选殖至载体上，要以PCR扩增这段DNA时，可根据质体multiple cloning sites两边的序，选用适当的核酸引子 (universal primers) 进扩增反应；比较常用的引子包括SP6,...[阅读全文]

1、基本要素和扩增原理 基本要素与DNA复制的基本要素是一致的。待拷贝的 DNA 称为模板，它可以是双链 DNA 也可是单链DNA，最后扩增得到的产物是双链状态的。引物是 DNA 复制的先锋，就象结晶过程中的晶核，引导 DNA 的合成。在 PCR 扩增中一般使用合成的寡核...[阅读全文]