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  • [免疫室] 蛋白印迹法检测技术原理

    蛋白印迹法检测技术(immunoblottingtest,IBT)亦称酶联免疫电转移印斑技术(enzyme linked immunoelectrotransfer blotting,EITB),因与Southern早先建立的检测核酸的印迹法Southernblot(DNA印迹法)相类似,亦被称为Westernblot。 Western印迹法是将蛋白质借...[阅读全文]

  • [病毒与微生物室] 病原体标本检测方法的类别

    病原体是导致感染性疾病的关键因素,也是区别于非感染性疾病的重要依据。迄今为止,已发现的病原体有:病毒、立克次体、支原体、衣原体、细菌、螺旋体、真菌、原虫和蠕虫9大类。病原学检测对于感染性疾病的诊断、合理应用抗感染药物以及防止耐药病原体的产生...[阅读全文]

  • [免疫室] 酶-抗酶复合物的制备方法

    PAP法,也称为非标记抗体酶法(unlabelled antibody enzyme method)。此法不用任何化学交联剂处理酶和抗体,二者活性不受化学反应的改变和损伤,从而可使免疫酶法的灵敏度大为提高,常用于ELISA和免疫组织化学染色。 PAP制备的基本原理:抗体与相应抗原在一...[阅读全文]

  • [PCR室] PCR设置内参照的定量方法

    PCR可分析极微量的DNA,并可同时扩增多种序列,已应用于基因转录水平的研究。尽管PCR是一种较理想的核酸定量方法,但实验方案的选择对PCR定量的成功与否极为重要,因为PCR是一个指数过程,控制反应率的任一参数的微小变化都会显著影响产物的生成量,在这些...[阅读全文]

  • [临检室] 细胞因子的流式细胞仪检测意义

    随着研究的进展,仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞表达特定细胞因子的手段包括: ELIspot 、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析(...[阅读全文]

  • [PCR室] PCR检测常见问题汇总(精品)

    PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究...[阅读全文]

  • [病理室] 免疫组化包埋前免疫纳米金单重染色

    免疫纳米金染色与免疫胶体金银法染色基本相似,也可分为包埋前染色和包埋后染色。下面分别介绍包埋前免疫纳米金单重染色和与免疫酶染色结合的双重染色基本程序: 包埋前免疫纳米金单重染色按以下步骤进行免疫染色: 1)含1%正常血清或l%BSA的PBS预孵育20~3...[阅读全文]

  • [免疫室] 杂交瘤细胞的冻存与复苏方法

    1.杂交瘤细胞的冻存 及时冻存原始孔的杂交瘤细胞每次克隆化得到的亚克隆细胞是十分重要的。因为在没有建立一个稳定分泌抗体的细胞系时,细胞培养过程中随时可能发生细胞的污染、分泌抗体能力的丧失等等。如果没有原始细胞.的冻存,则可因上述意外而前功尽...[阅读全文]

  • [免疫室] ELISA法检测肺炎支原体抗体IgM

    将微孔表面包被纯化的肺炎支原体抗原,将被稀释过的患者血清加入微孔中,如存在支原体抗体可与微孔上抗原相结合,然后洗去未结合物质,再加入酶标记抗人IgM与抗原抗体复合物结合,洗去未结合的酶标记抗体,最后加入显色液。在特定时间终止显色反应,通过酶标...[阅读全文]

  • [病理室] 组织免疫染色合适抗体的选择方法

    在组织或器官的免疫染色中遇到上述问题是很严重的。因此,选择最好的抗体用于组织染色极为重要。有些抗体在免疫斑点、免疫共沉淀甚至在培养细胞的染色中可获得满意的效果,但在组织免疫染色中可能是失败的。在免疫染色中遇到这些问题,主要是由于需在原位观...[阅读全文]

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