（二）扫描电镜摄影
1．检查电镜工作状态
（1）加速电压强度的选择：取决于样品的性质、图像反差和放大倍率。高倍观察时一般需要较高的加速电压，低倍观察时需要较低的加速电压。 实验室前沿，了解实验室动态
（2）聚光镜电流的选择：在保证图像亮度和反差要求前提下，尽可能加大聚光镜电流，以提高照片分辨力，加大景深。
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（3）物镜光阑孔的选择：对于表面结构高低差异大的样本可用较小的光阑孔，以获较大景深；低倍镜下观察时，可选用较大光阑孔，以增加视野内的信号强度。
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（4）选择摄影扫描速度。 内容来自实验室前沿网站
（5）视野选择：与透射电镜相同。
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2．确定曝光时间。在扫描电镜照相机处于光关？F8或F11情况下，照片的曝光时间在50～100s之间。 内容来自实验室前沿网站
3．样品的聚焦程度主要依靠操作人员的肉眼观察。拍摄较低放大倍数（＜1000倍）的图像，以调节粗聚焦钮为主；拍摄较高放大倍数（＞1000倍）图像，应先调节粗聚焦钮，再调节细聚焦钮。
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4．图像消像散：①先调节X方向旋钮，消除X方向的像散；②再调节Y方向旋钮，消除Y方向的像散；③最后再调节细聚焦钮，直到图像最清晰为止。
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5．调节高度和反差：扫描电镜一般装有亮度和反差自动调节按钮，按动该钮即可得到反差适当的图像。 copyright sysqy.com
6．拍摄：将照相机中的底片调至摄影位置，按动面板上的摄影快门钮，荧光屏上便由上而下自动扫描图像；扫描结束后，即完成一幅照片拍摄。
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7．底片选择：扫描电镜装有120或135照相机，故一般选择感光速度为ASA100的120或135胶卷，；装有Polaroid后背相机的扫描电镜，可进行一次成像。
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8．记录图像的摄影日期、摄影编号、样本编号、放大倍数、内容、摄影条件和备注等。
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五、暗室技术
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（一）暗室技术用于：①普通摄影、显微镜摄影和电镜摄影底片的冲洗，及其照片的洗印和放大；②幻灯片的制作等。 实验室前沿，了解实验室动态
（二）摄影底片的冲洗操作程序 实验室前沿，了解实验室动态
①于完全黑暗中取出全色底片（色盲片或电镜底片可在红灯下取出）→ ②将底片卷入螺旋形的槽内或显影架上 → ③清水湿润2min → ④显影3～12min（20℃）→ ⑤定影10～20min（20℃）→ ⑥水洗30min → ⑦凉干底片 → ⑧分类装入底片袋内，并做好记录。 本文来自实验室前沿
（三）试剂配制
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1. 显影液：有多种配方，组成成分大同小异。下列的D‐11配方兼用于冲洗底片和照片的洗印和放大显影： copyright sysqy.com
水（50℃） 500ml sysqy.com
米吐尔 1.0g
无水亚硫酸钠 75 g
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对苯二酚 9.0g sysqy.com
无水碳酸钠 25 g 本文来自实验室前沿
溴化钾 5 g copyright sysqy.com
加水至1 000ml sysqy.com
冲洗电镜底片、色盲片和制做幻灯片、显影照片等，需要极强反差，可用以上配方的原液显影。普通摄影用的全色底片对反差要求不很高，可将原液用清水稀释成1:2～1:4的工作液。 实验室前沿，了解实验室动态
2．停影液
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水 750ml
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28％醋酸 48ml
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加水至1000ml 本文来自实验室前沿
3. 定影液：较常用下列的F‐5酸性坚膜定影液
水（50℃） 600ml copyright sysqy.com
硫代硫酸钠 240g 本文来自实验室前沿
无水亚硫酸钠 15g sysqy.com
28％醋酸 48ml
硼砂（结晶） 7.5g
硫酸铝钾 15 g sysqy.com
加水至1000ml
（四）照片的洗印和放大 copyright sysqy.com
洗印和放大照片一般使用黑白放大相纸。这类相纸根据反差分为特软性、软性、中性、硬性和特硬性等5种，即0、1、2、3、4号相纸。较常用者为3号相纸。
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1. 洗印：在印相箱中操作（一般装有自动定时曝光控制器），主要用于制做透射电镜摄影的照片。已经曝光的像纸进入冲洗操作程序（同底片的冲洗程序）。 本文来自实验室前沿
2. 放大：在放大机上操作，主要用于制做显微镜摄影的照片。 copyright sysqy.com
（1）操作程序 sysqy.com
①放大镜头焦距的选择参见下表： 本文来自实验室前沿
底片规格 135 120 120 120 120
（16张） （12张） （10张） （8张） 负 片 负 片 负 片
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底片尺寸 sysqy.com
(mm×mm) 24×36 45×60 60×50 60×70 60×90 80×105 90×120 108×125
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镜头焦距 实验室前沿，了解实验室动态
(mm) 50 75 75～80 80～90 90～105 135 150 175 实验室前沿，了解实验室动态
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②装入底片：将底片的乳剂面向下，目测聚焦，使放大的图像结构清晰。 copyright sysqy.com
③选择相纸：常用3号放大纸。 copyright sysqy.com
④确定镜头光圈和曝光时间：对于正常反差的底片，将镜头光圈缩小到f/5.6至f/8之间，曝光时间控制在8～20s为宜。 sysqy.com
⑤将曝光后放大纸进入显影、定影程序中。
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六、数码摄影技术
数码摄影通常包括：①拍摄、②下载（将所拍摄的照片由数码相机下载到电脑中）、③修饰（加工处理等后期制作）和④分享（将经过修饰的照片输出，例如打印等）4个步骤。
（一）选择适当的照片质量要求
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数码相机的照片质量（解像度）分为①精细、②正常、③经济等档次。图像质量越好，每张照片占用的存储空间越大，在相同内存的情况下，解存储的照片数量越小。因此，在拍摄之前，应先根据需要，设定对于照片的质量要求，即设定压缩比。
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设定压缩比的原则是：①对照片质量要求越低，压缩比可越高；②只在监视器或电视机上观察图像而不打印时，压缩比可高些，可选择“正常”甚至“经济”档拍摄储存量小的图像。③需要打印照片（尤其欲获大幅彩色照片）时，压缩比越低越好，应选择“精细”档，最好选择不压缩的拍摄存储方式。
（二）力求曝光准确
1．数码相机的感光度最低为ISO60，最高为ISO6400，多在ISO100左右。ISO额定值较低时，解像度高、色调范围宽和反差低；ISO额定值较高时，解像度低、色调范围宽和反差高。 实验室前沿，了解实验室动态
2．选择感光度的原则：
（1）检查光线是否足够。 本文来自实验室前沿
（2）尽量用较低的感光度拍摄。 内容来自实验室前沿网站
（3）曝光时间不要过长。照度低时，应尽量利用闪光拍摄。避免进行高感光度的长时间曝光。 实验室前沿，了解实验室动态
（4）曝光准确与否决定于对照片质量的要求。
（三）注意对焦条件。 实验室前沿，了解实验室动态
（四）注意用光。
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（五）准确使用快门和光圈：宜用自动模式（Auto）拍摄。使用手动相机或将自动相机设置于手动模式时，需要随时进行调整。 copyright sysqy.com
（六）正确设定白平衡：拍摄前设定自动白平衡，或是将白平衡调整设定在与拍摄光照条件一致的档上。 实验室前沿，了解实验室动态
（七）正确使用存储媒介：向数码相机内插入移动式存储卡时，一定要到位；从相机中取出存储卡时，要防止滑落到坚硬的物面上，以免不能读取照片的某些数据，甚至损坏存储卡。 内容来自实验室前沿网站
（八）勿距摄影客体过远：适当拍摄距离为5～15尺。拍摄小物体、文件等时 ，应启动数码相机的近摄功能。 本文来自实验室前沿
（九）及时删除不需要的照片。
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