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丙酮干燥粉的制备

时间:2010-05-25 04:37|来源:实验室前沿| 分享|点击:


   1.组织和细胞生理盐水均匀悬液的制备:仔细去除组织中的筋膜后研磨或将整个组织块放入匀浆器中匀浆。1z组织大约用lml生理盐水悬浮。 本文来自实验室前沿

    2.将组织/生理盐水悬液置冰上5rain。
 
    3.每2ml细胞悬液加8ml冷丙酮(—20C预冷)。充分混匀 ,置O℃作用30min,其间混匀数次。
 
    4.10000g离心lOmin,弃上清液,收集沉淀物。
 
    5.用—2012冷丙酮重悬并混匀,置O℃ lOmin。
 
    6.10000g离心lOmin,弃上清液,将沉淀团转移至干净滤纸上,将沉淀物分散并让其在室温下空气中风干,直到沉淀物充分干燥和分散。
 
    7.待粉末干燥后,转至密闭的容器内,弃去不能分散成粉末的大块沉淀。丙酮组织干粉的产量约为原湿重的10%一20%。使用时,加入终浓度为1%的丙酮组织干粉,4C孵育30min后,10000g离心lOmin,收集上清液作为经过吸收处理的抗体用于免疫学实验。
Tags:干燥,沉淀,lOmin,组织,10000g,离心,分散,
责任编辑:何辉

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