| 纤维蛋白原凝结时间测定（FIB）标准操作规程， 首先了解纤维蛋白原测定（Clauss法）的原理：凝血酶将可溶性的血浆蛋白纤维蛋白原转化为不溶性的多聚体，纤维蛋白。当凝血酶浓度较高（约为100NIH/ml）且纤维蛋白原浓度较低（0.05—0.8g/L）时该反应决定于纤维蛋白原浓度。如在双对数坐标纸上画点，凝血酶凝块时间与纤维蛋白原浓度相比较呈线形关系。 |
一、项目名称:
纤维蛋白原凝结时间测定（Fibrinogen coagulative time, FIB）
二、检验方法名称：
凝结法
三、方法学原理：
在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后，加入试剂。加入试剂后，采用波长为660nm的光照射样本。凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。从散射光光强度的测定，可以做出凝血曲线，通过Percentage Detection Method方法求得凝血时间。
四、方法学溯源：
纤维蛋白原测定（Clauss法）原理：凝血酶将可溶性的血浆蛋白纤维蛋白原转化为不溶性的多聚体，纤维蛋白。当凝血酶浓度较高（约为100NIH/ml）且纤维蛋白原浓度较低（0.05—0.8g/L）时该反应决定于纤维蛋白原浓度。如在双对数坐标纸上画点，凝血酶凝块时间与纤维蛋白原浓度相比较呈线形关系。
五、仪器：
（一）型号：Sysmex CA—1500自动血液凝血分析仪
（二）分析和计算参数：
1．处理量：约120个测试/小时
2．所需样本量：10μl
3．检验时间：在最长检验时间之内测出结果，典型最长检验时间：100秒
4．重复性：CV≤4%
5. 计算参数：纤维蛋白原浓度（Fbg） sysqy.com
六、试剂及配套品：
（一）试剂：
1. 凝血酶试剂（Thrombin Reagent）
（1）商标：德灵（DADE BEHRING）
（2）包装规格：Pack for 10×1ml
（3）代码：B4233 G25 E0533 (961) W
（4）成分：
牛凝血酶冻干粉（lyophilized preparation of bovine thrombin）（近似100 NIH units/ml）
2．佛罗那巴比妥缓冲液（Dade® Owren'S Veronal Buffer）
（1）商标：德灵（DADE BEHRING）
（2）包装规格：Pack for 10×10ml
（3）代码：B4234-25
（4）成分：
1）2.84×10²M的巴比妥钠 (sodium barbital)
2）1.25×10¹M的氯化钠 (sodium chloride)
3) PH 7.35±0.1
3. 清洗液（Cleaning）
2%次氯酸钠溶液（自配）
（二）配套品：
1.标准血浆（Standard Human Plasma）
(1) 商标：德灵（DADE BEHRING）
(2) 代码：No. ORKL
2.校准质控血浆（Ci-Trol®）
(1) 商标：德灵（DADE BEHRING）
(2) 代码：Level 1, B4244-10
Level 2, B4244-20 sysqy.com
Level 3, B4244-30
3.质控血浆（Control Plasma）
(1) 商标：太平洋（Pacific Hemostasis）
(2) 代码及规格：Level 1 (Normal), 100595 10×1ml
Level 2 (Abnormal), 100596 10×1ml
Level 3 (Abnormal), 100597 10×1ml
七、操作步骤：
（一） 开机：开机前，先打开连机的打印机。按下机器右边的POWER按钮。开机后机器进行自检，当屏幕上边显示“Ready”时可以进行试验。
（二）洗针：在主屏幕上选“Rinse Probe”，然后按下“Execute”进行洗针。
（三）准备试剂：按照仪器试剂位置程序要求，把每一项的试剂准备好，放在相应的位置。（注：FIB试剂的配制：在冻干粉试剂瓶中加入1ml的蒸馏水，放置室温30min。）
