一、 方法学原理 内容来自实验室前沿网站
电泳法
二、 试剂
美国HELENA公司IFE产品
三、 操作
1. 电泳:仪器型号:SPIFE 3000
1.1 开机:打开仪器右侧电源开关。
1.2 待仪器自检后,打开仪器右侧盖板。
1.3 按u键,使加样架右移,放入样本盘,样本盘上按所选用的电泳膜加样,每份标本加样20μl。
1.4 按t键,使加样架左移,按需要放入新加样梳,在加样梳上加上骑码。
1.5 在电极铜板上加电极液,将电泳膜放置在铜板上,小心勿出气泡。
1.6 在胶桥上放置炭棒。
1.7 用C型滤纸吸干电泳膜表面
1.8 按u键选取IFE,按t键2次,开始电泳,仪器自动操作。
1.9 电泳毕,取出炭棒。
1.10 用小铲铲去胶桥。
1.11 擦干铜板,丢弃加样梳,洗净样本盘。
2 抗原抗体反应 SPIFE 3000
2.1 在胶膜上加抗体模板
2.2在抗体模板槽孔中加抗体40μl,按u键,仪器自动孵育。
2.3 在抗体模板槽孔中插入滤纸梳,吸去多余抗体,按u键,仪器自动操作。
2.4 取下抗体模板,用D型滤纸吸干电泳膜表面,按u键,仪器自动操作。
2.5 取下D型滤纸,干燥胶膜表面,按u键,仪器自动操作。
3 染色:仪器型号:SPIFE 3000
3.1 吹干电泳膜剩余水分,将电泳膜夹到染色架上。
3.2 将染色架放回染色槽。
3.3 按test select选取SPE,按start 2次,开始染色,仪器自动操作。
3.4 待染色结束后,取出胶膜。
4 扫描:仪器型号:REP
4.1 扫描,打开下方仪器开关。REP
4.2 待仪器自检后,点击扫描,进入扫描菜单
4.3 选取SPE,及所用电泳膜型号。
4.4 按当日操作情况编制参数。
4.5 仪器自动扫描
4.6 结果观察。
四、 临床意义:
M蛋白病患者在相应的单克隆增殖株处可见异常浓集区带。
五、 标本要求
血清,可4℃保存,一周内完成测定,避免反复冻融。
六、 操作注意事项
1. 每次开机测试前采用HELENA公司质控品作为室内质控。
2. 在电极铜板上加电极液,将电泳膜放置在铜板上,小心勿出气泡。
七、 参考文献
全国临床检验操作规程(第二版)